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瓊脂糖/磁珠偶聯(lián)的His標簽抗體,IP效果如此好

時間:2018/8/1閱讀:1718
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    什么樣的標簽適合用于免疫沉淀呢?

 

    His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優(yōu)勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用為廣泛的一種。His抗體也常用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。  

 

瓊脂糖&磁珠偶聯(lián)的Flag標簽抗體

 

    為什么推薦使用His標簽抗體偶聯(lián)的瓊脂糖/磁珠?

 

    與使用Protein A/G瓊脂糖的傳統(tǒng)免疫沉淀(IP)方法相比,Abbkine的瓊脂糖/磁珠偶聯(lián)標簽抗體省去了Protein A/G與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合的步驟。偶聯(lián)抗體直接和目標蛋白結(jié)合后,通過離心或使用磁力架,將目標蛋白從細胞裂解液中分離出來。不僅讓實驗變得簡單快捷,更可以避免非特異性結(jié)合,降低背景。表位標記蛋白的免疫沉淀可用于確定蛋白的細胞定位、研究翻譯后修飾或檢測標記蛋白與其它蛋白之間的相互作用。  

 

  •     看到這里,您肯定會問,Protein A/G的缺點是什么?

 

  1.     1.耗時:使用Protein A/G需要額外的孵育與洗滌操作
  2.     2.效果差:當抗體種屬、亞型和ProteinA/G不匹配時,ProteinA/G和抗體結(jié)合能力弱
  3.     3.背景高:和樣本中的其他免疫球蛋白結(jié)合,產(chǎn)生非特異性結(jié)合,導(dǎo)致高背景。  

 

    這就是艾美捷科技為您推薦瓊脂糖/磁珠偶聯(lián)His標簽抗體的原因:

 

產(chǎn)品名稱貨號應(yīng)用
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody, 瓊脂糖A02050AGBIP
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody, 磁珠A02050MGBIP

 

瓊脂糖&磁珠偶聯(lián)的Flag標簽抗體

       瓊脂糖/磁珠偶聯(lián)His標簽抗體,優(yōu)勢更加突出:  

 

  •     高特異性—高特異性單克隆標簽抗體可實現(xiàn)高產(chǎn)量和高純度免疫沉淀
  •     低背景—穩(wěn)定、預(yù)封閉的填料及特異性抗體減少了免疫沉淀過程中的非特異性結(jié)合
  •     規(guī)格靈活:100ul, 400ul, 2ml,多規(guī)格可供選擇。滿足不同規(guī)模的免疫沉淀需求
  •     操作方便—產(chǎn)品說明書提供了免疫沉淀優(yōu)化方案,一次免疫沉淀時間約1 - 2小時
  •     兼容性強—填料可以兼容手動及自動化操作

 

        瓊脂糖/磁珠偶聯(lián)His標簽抗體使用說明:

 

  •     * 瓊脂糖微球是多孔的,這使得它們具有高的表面積與蛋白質(zhì)相互接觸,并可以容納大量的液體。在純化大量蛋白的時候,傳統(tǒng)的瓊脂糖微球偶聯(lián)抗體是IP實驗的選擇。(瓊脂糖:每個樣品加入20ul懸液)
  •     * 在IP實驗中,由于所有的相互作用均發(fā)生在磁珠的外表面,并且磁珠的尺寸更均一,所以磁珠的可重復(fù)性和純度通常高于瓊脂糖。磁性分離不需要離心和多次洗滌,且孵育時間短,在日常小規(guī)模、快速處理多個樣品的IP實驗時,磁珠偶聯(lián)抗體更簡單、更快速。(磁珠:每個樣品加入10-20ul懸液)
  •     提供形式:液體(抗體-瓊脂糖/磁珠復(fù)合物:保護液=1:1,50%的懸浮液)
  •     *  儲存方式:4°C可保存一年,瓊脂糖偶聯(lián)標簽抗體避免凍融和渦旋;磁珠偶聯(lián)標簽抗體避免凍融和離心

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