的蛋白質定量是蛋白質相關實驗所必需的,這些實驗涉及分子生物學,細胞生物學,生物化學,發(fā)育生物學和神經(jīng)科學的研究課題。常用的蛋白質定量分析方法主要是BCA法和Bradford法,這兩種方法各有所長,研究者需要根據(jù)裂解液的情況,進行選擇。
關于實驗的原理:
BCA法實驗原理:堿性條件下,蛋白質分子中的肽鍵結構能與Cu2+結合生成紫色絡合物,同時將Cu2+還原為 Cu+。BCA試劑可靈敏特異的與Cu+結合,形成穩(wěn)定的有顏色的絡合物,562nm處有高的吸收值,可在 540-595nm測定其吸收值,顏色的深淺與蛋白質濃度成正比
Bradford法實驗原理:考馬斯亮藍G250,在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當它與蛋白質結合后變?yōu)?青色,蛋白質—色素結合物在595nm波長下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成正比。
好吧,我決定還是說人話,關于蛋白質定量方法選擇之秘籍(BCA蛋白質定量試劑盒和Bradford蛋白質定量試劑盒):
如果裂解液中含有較高濃度的如下組分 | 請選擇此方法 |
去污劑:SDS、Triton X-100,Tween 20等 | BCA-KTD3001 |
還原劑:DTT、TCEP 和 β-巰基乙醇等 | Bradford-KTD3002 |
為什么推薦Abbkine精心準備的蛋白質定量組合方案呢?
產品名稱 | 原理 | 貨號 |
Protein Quantification Kit (BCA Assay) | BCA | KTD3001 |
Protein Quantification Kit (Bradford Assay) | Bradford | KTD3002 |
BCA蛋白質定量試劑盒和Bradford蛋白質定量試劑盒產品特點:
" 節(jié)省時間 — 比傳統(tǒng)的Lowry方法更容易,速度快4倍。
" 靈敏高 — 檢測線低至25ug/ ml,低檢測蛋白量達到0.5ug。
" 線性 — 線性標準曲線范圍:50 - 1000 ug/ml
" 良好的穩(wěn)定性 — 與染料結合的方法相比,蛋白質與蛋白質間差異更小。
" 性價比高 — 良好的性價比,單次實驗,成本更低!
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