EZElisa雌二醇ELISA試劑盒參數(shù)分析&樣品制備方案

雌二醇（E2）是一種類固醇激素，屬于雌激素，也是主要的女性性激素。它以及在調(diào)節(jié)發(fā)情和月經(jīng)女性生殖周期方面起著重要作用。雌二醇在青春期、成年期和妊娠期間對(duì)于女性生殖組織（如乳房、子宮和陰道）的發(fā)育和維持至關(guān)重要，但它也對(duì)許多其他組織產(chǎn)生重要影響，包括骨骼、脂肪、皮膚、肝臟和大腦。雖然男性的雌激素水平較女性低，但雌激素在男性中也有重要功能。它存在于大多數(shù)脊椎動(dòng)物、甲殼動(dòng)物、昆蟲、魚類和其他動(dòng)物物種中。該試劑盒采用競爭性抑制酶免疫測(cè)定技術(shù)。所提供的微孔板已經(jīng)預(yù)包被了特異性抗雌二醇抗體。標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。競爭性抑制反應(yīng)在HRP標(biāo)記的雌二醇與未標(biāo)記的雌二醇與抗體之間展開。將底物溶液加入到孔中，顏色的發(fā)展與樣品中雌二醇的含量相反。停止顏色的發(fā)展并測(cè)量顏色的強(qiáng)度。

艾美捷EZElisa雌二醇ELISA試劑盒基本參數(shù)：

目錄號(hào)：D-AEK0003

規(guī)格：48T/96T

儲(chǔ)存：在4°C下儲(chǔ)存12個(gè)月，避光。

檢測(cè)范圍：40 pg/mL-1,000 pg/mL

靈敏度：40 pg/mL

精密度：內(nèi)部試驗(yàn)精密度：變異系數(shù)（CV）＜15%。間接試驗(yàn)精密度：變異系數(shù)（CV）＜15%

恢復(fù)率：恢復(fù)率范圍為85%至115%，總體平均恢復(fù)率為100%

特異性：EZElisa™雌二醇（E2）ELISA試劑盒對(duì)雌二醇的檢測(cè)具有高靈敏度和優(yōu)異的特異性。未觀察到雌二醇與類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾。

適用樣品：血清、血漿

供應(yīng)材料和儲(chǔ)存條件：

Note: Std1: 0 pg/mL; Std2: 40 pg/mL; Std3: 100 pg/mL; Std4: 200 pg/mL; Std5: 400 pg/mL; Std6；1,000 pg/mL.

EZElisa雌二醇ELISA試劑盒試劑準(zhǔn)備：

注意：使用前將所有試劑平衡至室溫。按照微孔板讀數(shù)儀的說明進(jìn)行設(shè)置，并在測(cè)量光密度之前預(yù)熱15分鐘。

1×洗滌緩沖液：將洗滌緩沖液（20×）用去離子水稀釋1:20，得到1×洗滌緩沖液。儲(chǔ)存在4°C。如果洗滌緩沖液濃縮物中形成了結(jié)晶，請(qǐng)輕輕加熱至完-全溶解。儲(chǔ)存在室溫下。請(qǐng)注意，1×洗滌緩沖液穩(wěn)定期為30天。

工作溶液：根據(jù)辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇的體積取相應(yīng)的檢測(cè)緩沖液1/10，并與辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇混合，得到工作溶液，使用前進(jìn)行混合。例如：取3 mL辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇，加入0.3 mL檢測(cè)緩沖液，混合得到工作溶液。

EZElisa雌二醇ELISA試劑盒樣品制備：

1.血清：使用血清分離管，在室溫下凝固樣品30分鐘后，以1,000 g的速度離心15分鐘。立即使用血清進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)悠贩盅b并儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

2.血漿：使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在采集后30分鐘內(nèi)以1,000 g的速度離心15分鐘。立即進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)悠贩盅b并儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

注意：不要使用明顯溶血或脂肪乳化的樣本。如果樣品將在24小時(shí)內(nèi)使用，可以儲(chǔ)存在2到8°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。在進(jìn)行檢測(cè)前，應(yīng)將冷凍樣品緩慢恢復(fù)至室溫，并輕輕混勻。

程序分析：

1. 從微孔板架上取下多余的微孔板條，將它們放回包含干燥劑包的鋁箔袋中，并重新密封。

2. 每個(gè)孔中加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品。建議將所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣品都復(fù)制加入微孔板中。設(shè)置一個(gè)空白孔，不加入任何溶液。

3. 向每個(gè)孔中加入50 μL工作溶液（空白孔除外），充分混勻，用提供的孔蓋蓋好，然后在37°C下孵育1小時(shí)。

4. 倒掉每個(gè)孔中的液體并進(jìn)行洗滌，總共洗滌三次。使用多通道移液器或自動(dòng)微孔板洗滌器，將每個(gè)孔填滿1×洗滌緩沖液（250 μL），靜置10秒鐘，每個(gè)步驟中完-全去除液體對(duì)良好的性能至關(guān)重要。在最后一次洗滌后，倒轉(zhuǎn)孔板并用干凈的紙巾輕輕拍干任何剩余的1×洗滌緩沖液。

5. 向每個(gè)孔中加入50 μL HRP底物A和50 μL HRP底物B，充分混勻，并用提供的孔蓋蓋好。在37°C下孵育15分鐘。將孔板放在黑暗中，遠(yuǎn)離氣流和其他溫度波動(dòng)。

6. 向每個(gè)孔中加入50 μL停止溶液。停止溶液應(yīng)按照HRP底物的加入順序加入到孔板中?？字械念伾珣?yīng)從藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果孔中的顏色是綠色，或者顏色變化不均勻，請(qǐng)輕輕敲擊孔板以確保充分混合。

7. 在30分鐘內(nèi)使用設(shè)置為450 nm的微孔板讀數(shù)儀測(cè)定每個(gè)孔的光密度。

該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。