游離膽固醇 (FC) 檢測(cè)試劑盒的樣品準(zhǔn)備方法

游離膽固醇（Free cholesterol，FC）是細(xì)胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸和維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。組織中的游離膽固醇濃度可作為衡量脂質(zhì)代謝的指標(biāo)。EZMeta™ 游離膽固醇（FC）比色法檢測(cè)試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便的方法，用于檢測(cè)動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、血清和血漿等生物樣品中的游離膽固醇。其原理是膽固醇氧化酶催化游離膽固醇生成Δ4-膽甾酮和H2O2，過(guò)氧化物酶催化H2O2、4-氨基苯酚和酚生成紅色醌化合物，其吸收峰位于500 nm，顏色的深淺與游離膽固醇含量成正比。

艾美捷 游離膽固醇 (FC) 檢測(cè)試劑盒：

貨號(hào)：D-AKC2210

規(guī)格：48T / 96T

儲(chǔ)存條件：儲(chǔ)存在4°C下，避光，保存12個(gè)月

適用樣本：血清、血漿、動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌

所需材料但不提供：

·能夠測(cè)量500 nm吸光度的微孔板讀數(shù)器或可見(jiàn)光分光光度計(jì)

·96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液頭

·冰制造機(jī)、冷藏離心機(jī)、水浴

·無(wú)水乙醇 ·勻漿機(jī)（用于組織樣本）

試劑制備：

FC工作溶液：按提供的狀態(tài)直接使用。使用前平衡至37°C。儲(chǔ)存在4°C。 標(biāo)準(zhǔn)品：按提供的狀態(tài)直接使用。使用前平衡至室溫。儲(chǔ)存在4°C，避光保存。 制定標(biāo)準(zhǔn)曲線：將2 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)品用無(wú)水乙醇稀釋至表格中所示的1、0.5、0.25、0.125、0.063、0.031 µmoL/mL。

游離膽固醇 (FC) 檢測(cè)試劑盒樣品制備：

注意：建議使用新鮮樣品。如果不能立即測(cè)定，樣品可以在-80°C下保存一個(gè)月。 1. 動(dòng)物組織：稱取約0.1 g組織，加入1 mL無(wú)水乙醇。在冰上勻漿。以8,000 g離心10分鐘，4°C。使用上清液進(jìn)行測(cè)定，并放置在冰上進(jìn)行測(cè)試。 2. 細(xì)胞或細(xì)菌：收集5×10^6個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管中，在離心后棄去上清液；加入1 mL無(wú)水乙醇，在冰浴中超聲破碎細(xì)胞或細(xì)菌5分鐘（功率20%或200 W，超聲3秒，間隔7秒，重復(fù)30次）。以8,000 g離心10分鐘，4°C。使用上清液進(jìn)行測(cè)定，并放置在冰上進(jìn)行測(cè)試。 3. 血清（血漿）樣品：直接進(jìn)行測(cè)試。 注意：如果通過(guò)蛋白質(zhì)濃度計(jì)算含量，最好使用EZMeta™ 游離膽固醇（FC）比色法檢測(cè)試劑盒定量總蛋白質(zhì)。

游離膽固醇 (FC) 檢測(cè)試劑盒典型數(shù)據(jù)：

該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途