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三維(3D)凝膠可以研究細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的機(jī)械性質(zhì),如密度和剛度,對細(xì)胞發(fā)育、遷移和形態(tài)的影響。與二維系統(tǒng)不同,三維環(huán)境使細(xì)胞伸展能夠同時與所有細(xì)胞表面上的整合素相互作用,從而激活特定的信號通路。凝膠的剛度或硬度也會對細(xì)胞在三維與二維環(huán)境中的遷移產(chǎn)生不同的影響。此外,在三維系統(tǒng)中,由于細(xì)胞伸展與基質(zhì)纖維的糾纏,還可能出現(xiàn)整合素非依賴的機(jī)械相互作用,而在二維系統(tǒng)中,細(xì)胞附著在平坦表面上無法發(fā)生這種相互作用。
艾美捷Advanced BioMatrix PhotoCol:一種經(jīng)過純化的甲基丙烯?;疘型牛膠原套裝,可以制備具有天然樣式的可調(diào)節(jié)性3D膠原凝膠,并通過紫外光交聯(lián)。PhotoCol 套裝包括純化的甲基丙烯酰化I型牛膠原作為核心成分,以及套裝中的其他輔助試劑。
PhotoCol 甲基丙烯酸酯膠原蛋白(僅膠原蛋白),100 毫克:
膠原從牛皮中提取,含有高含量的單體。膠原起始材料來自一個封閉的牛群,并使用控制的制造過程進(jìn)行純化。
提供20 mM乙酸溶液,以在濃度范圍為3至8 mg/ml的條件下溶解凍干的甲基丙烯?;z原。
中和溶液由堿性的10倍磷酸鹽緩沖鹽溶液(PBS)組成,可在最終混合物中提供生理鹽和中性pH。
光引發(fā)劑溶液由Irgacure 2959在甲醇中配制而成(甲醇不包括在內(nèi)),可使膠原在365 nm下進(jìn)行紫外光交聯(lián)。
儲存/穩(wěn)定性:產(chǎn)品在凍膠冰袋上運送。收到后,將膠原、乙酸和光引發(fā)劑儲存于2至10攝氏度。不要冷凍。將中和溶液儲存在室溫下。適當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品標(biāo)簽和分析證書上印有有效期日期。當(dāng)產(chǎn)品按照指示處理和儲存時,有效期適用。在用乙酸溶解膠原后,膠原溶液在2至10攝氏度下儲存時穩(wěn)定期為2個月。
凝膠硬度:PhotoCol?試劑盒旨在根據(jù)膠原濃度和交聯(lián)程度提供具有不同硬度的膠原凝膠。
美國Advanced BioMatrix是3D組織培養(yǎng)、細(xì)胞檢測和細(xì)胞增殖等領(lǐng)域?qū)嶒灲鉀Q方案,在分離、純化、凍干、細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白檢測、多肽粘附、附著因子、基質(zhì)硬度和其他3D matrix 產(chǎn)品開發(fā)方面有著豐富的經(jīng)驗。
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