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聚苯乙烯熒光微球在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著越來越廣泛的應(yīng)用,其中的一項(xiàng)重要應(yīng)用是基于熒光微球的流式細(xì)胞分析技術(shù),該技術(shù)可廣泛用于細(xì)胞分選,定量,免疫分析及快速診斷.該技術(shù)采用兩種粒子:熒光標(biāo)準(zhǔn)校正微球用于儀器的校正及定量研究,熒光編碼微球用于高通量免疫分析,而這兩種粒子都要求熒光強(qiáng)度高,精確定量染色,單分散性好。
艾美捷SPHERO 熒光微球 能夠攜帶許多熒光分子,較弱的刺激就可以引發(fā)較強(qiáng)的信號,所以只需要少量的低能輻射就能產(chǎn)生熒光信號,避免了使用傳統(tǒng)的放射性微球造成的輻射危險(xiǎn),并在不損失檢測靈敏度的前提下降低了成本。因此在眾多領(lǐng)域都具有廣泛的應(yīng)用,如生物化學(xué)、生物醫(yī)藥、臨床醫(yī)學(xué)、基因分析以及光學(xué)儀器等,熒光微球在醫(yī)藥、生物方面的應(yīng)用尤為重要。
Spherotech熒光微球包括SPHEROTM聚苯乙烯熒光微球、高熒光強(qiáng)度和低熒光強(qiáng)度的微球、熒光PMMA微球、多重?zé)晒饣鶊F(tuán)的微球和FITC標(biāo)記的微球(可用于流式細(xì)胞儀的校準(zhǔn)及不同的流式細(xì)胞數(shù)據(jù)的歸一化)。
Spherotech熒光微球的應(yīng)用:
①在標(biāo)記和示蹤方面的應(yīng)用
通過在聚合物微球表面或內(nèi)部引入一種或多種熒光物質(zhì)制備的熒光微球,可應(yīng)用到細(xì)胞標(biāo)記、生物分子標(biāo)記及在活性條件下的示蹤,也可固定蛋白質(zhì)分子等,并跟蹤其功能化過程。
②在檢測方面的應(yīng)用
將表面帶有能與被檢測物結(jié)合的配體的熒光微球與放射標(biāo)記的被檢測物相混合,體系中能與微球結(jié)合的被檢測物,其放射能激發(fā)熒光物質(zhì)產(chǎn)生熒光,而不能與微球結(jié)合的被檢測物,其放射能在水中淹滅,不能激發(fā)熒光,從而可以對被檢測物進(jìn)行檢測。此外,熒光微球能夠攜帶許多熒光分子,較弱的刺激就可以引發(fā)較強(qiáng)的信號,所以只需要少量的低能輻射就能產(chǎn)生熒光信號,避免了使用傳統(tǒng)的放射性微球造成的輻射危險(xiǎn),并在不損失檢測靈敏度的前提下降低了成本。
③在免疫分析、藥物篩選方面的應(yīng)用
1)熒光微球由于其可作為診斷試劑而應(yīng)用于免疫分析。
熒光微球作為不同檢測對象的固定化載體應(yīng)用于生物樣品檢測中,不同熒光微球?qū)?yīng)不同的捕獲抗體,識別不同的抗原,從而實(shí)現(xiàn)多種待測抗原定性及定量檢測。
2)熒光微球表面連接可與待測物結(jié)合的受體,將待測物(配體)進(jìn)行放射性同位素標(biāo)記,兩者混合后,能與微球結(jié)合的待測物的放射性能激發(fā)熒光物質(zhì)產(chǎn)生熒光,而不能與微球結(jié)合的待測物,由于距離微球較遠(yuǎn),則不能激發(fā)熒光物質(zhì)產(chǎn)生熒光,從而達(dá)到了篩選的目的。高通量藥物篩選(HTS)是使用機(jī)器人和自動(dòng)化系統(tǒng),從大量的樣本中鑒別出對確定的分子靶標(biāo)有相互作用的少量活性化合物的一種現(xiàn)代藥物篩選技術(shù)。熒光微球的發(fā)展促進(jìn)了HTS的開發(fā)與發(fā)展。
④在固定化酶,基因研究方面的應(yīng)用
1)酶可以通過物理吸附或化學(xué)鍵合方式固定在熒光微球上,由于酶的立體形態(tài)被固定,使其不但具有較高的pH穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性和貯存穩(wěn)定性,而且易與反應(yīng)物分離,可以重復(fù)使用,提高使用效率。因此,在微球載體上固定化酶或其它生物活性物質(zhì), 更有利于其功能的發(fā)揮。
2)納米級熒光微球的尺寸與生物分子如核苷酸、蛋白質(zhì)等尺度相當(dāng),表面連接或包埋大量熒光分子聚合物。將此類微球連接在核苷酸鏈上,便可替代傳統(tǒng)芯片雜交熒光標(biāo)記技術(shù),實(shí)現(xiàn)熒光信號的放大,從而大大降低了基因芯片的成本。
⑤在標(biāo)準(zhǔn)物和生物探針方面的應(yīng)用
1)熒光微球在細(xì)胞流式記數(shù)測定方面有很重要的應(yīng)用 ,如用做測定的標(biāo)準(zhǔn)物以及用來校準(zhǔn)細(xì)胞流式記數(shù)儀。
2)制備含有Cd Te量子點(diǎn)的聚苯乙烯微球,其表面吸附兔的免疫球蛋白后,可以作為蛋白質(zhì)靈敏檢測探針,且這種生物功能性標(biāo)記的量子點(diǎn)微球具有簡單、快速和實(shí)用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
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