PureCol，牛去端膠原溶液的用途說明及保存條件

PureCol 牛去端膠原溶液是一種 3 mg/ml I 型牛去端肽膠原溶液，用于 2D 和 3D 細(xì)胞培養(yǎng)，或作為膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。 PureCol 被譽(yù)為膠原蛋白產(chǎn)品純度（≥99.9% 膠原蛋白含量）、一致性和可重復(fù)性的標(biāo)準(zhǔn)，并在超過 2000 種出版物中被引用。 PureCol 膠原蛋白大約 97% 為 I 型去端膠原，其余為 III 型膠原蛋白。 PureCol 膠原蛋白的濃度約為 3 mg/ml。每個特定批次的濃度均在購買每個產(chǎn)品時提供的分析證書上提供。 PureCol 是可溶于 0.01 N HCl 的去端肽膠原，因此 pH 值為 2。PureCol 膠原蛋白非常適合表面涂層、為培養(yǎng)細(xì)胞提供薄層準(zhǔn)備或用作固體凝膠。 PureCol 膠原蛋白采用用戶友好型包裝，便于使用和儲存。 PureCol 經(jīng)過無菌過濾，作為即用型溶液提供。

艾美捷PureCol，牛去端膠原溶液（ABM-5005-100ML）儲存/穩(wěn)定性：

儲存在2-10攝氏度，并在冷凍膠凍包裝上發(fā)貨。請勿冷凍。產(chǎn)品標(biāo)簽和每個特定批次的分析證書上列有有效期。產(chǎn)品在按照指示處理和儲存時適用有效期。注意事項和免責(zé)聲明：本品僅用于研究和開發(fā)，不適用于人類或其他用途。請參閱有關(guān)危害和安全操作規(guī)程的物質(zhì)安全數(shù)據(jù)表。

涂層步驟注意事項：請將以下建議作為指導(dǎo)，確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適涂層條件。

1. 從瓶中取出所需量的膠原蛋白，倒入稀釋容器中。

2. 將PureCol®稀釋至約50至100 µg/ml（~1:30）的水中。也可使用0.01 N鹽酸溶液。

3. 輕輕攪拌混合物，直至完-全混合。

4. 向培養(yǎng)表面添加適量稀釋的PureCol®物質(zhì)，確保整個表面都被涂層。

5. 在室溫下蓋上蓋子孵育1-2小時。吸去任何剩余物質(zhì)?；蛘?，直到表面干燥為止，也可在室溫下孵育。

6. 用無菌培養(yǎng)基或PBS小心沖洗涂層表面，避免劃傷表面。

7. 涂層表面已準(zhǔn)備就緒，也可在2-10°C潮濕或風(fēng)干存放，如果保持無菌性。

三維凝膠制備步驟

1. 緩慢地將1份冷卻的10倍PBS或10倍培養(yǎng)基加入8份冷卻的膠原溶液中，輕輕攪拌。

2. 使用無菌0.1 M氫氧化鈉將混合物的pH調(diào)整至7.0-7.5。仔細(xì)監(jiān)控pH調(diào)整（pH計、酚紅或pH試紙）。

3. 用無菌水調(diào)整最終體積至總共10份。

4. 為防止凝膠化，保持混合物的溫度在2-10攝氏度。

5. 為形成凝膠，加熱至37攝氏度。允許大約90至120分鐘形成凝膠。

PureCol，牛去端膠原溶液部分文獻(xiàn)參考：

1. Tanzer, M. L., Cross-linking of collagen. Science, 180(86), 561-566 (1973).

2. Bornstein, P., and Sage, H., Structurally distinct collagen types. Ann. Rev. Biochem., 49, 957-1003 (1980).

3. Tomasek, J.J., and Hay, E.D., Analysis of the role of microfilaments in acquisition and bipolarity and elongation of fibroblasts in hydrated collagen gels. J. Cell Biol., 99, 536-549 (1984).

4. Roeder, B.A., et al., Tensile mechanical properties of three-dimensional type I collagen extracellular matrices with varied microstructure. J. Biomech. Eng., 124, 214-222 (2002).

5. Sato, M., et al., 3-D Structure of extracellular matrix regulates gene expression in cultured hepatic stellate cells to induce process elongation. Comp Hepatol., Jan 14;3 Suppl 1:S4 (2004).

6. Li, G.N., et al., Genomic and morphological changes in neuroblastoma cells in response to three-dimensional matrices. Tissue Eng., 13, 1035-1047 (2007).

7. Karamichos, D., et al., Regulation of corneal fibroblast morphology and collagen reorganization by extracellular matrix mechanical properties. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 48, 5030-5037 (2007).

8. Wozniak, M.A., and Keely, P.J., Use of three-dimensional collagen gels to study mechanotransduction in T47D breast epithelial cells. Biol. Proced. Online, 7, 144-161 (2005).