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三肽Arg-Gly-Asp(RGD)是蛋白與細胞表面結合中的重要蛋白序列。最初在纖維連接蛋白中識別到RGD基序作為介導細胞附著的最小序列。研究還表明,RGD基序存在于其他蛋白中,如膠粘蛋白、維膜蛋白、骨橋蛋白、膠原蛋白、凝血調(diào)節(jié)蛋白和許多其他因子中。許多粘附細胞表面受體識別RGD序列以進行細胞附著。Advanced BioMatrix的RGD PEPTITE-2000®已經(jīng)專門為研究人員的使用方便而開發(fā)。該產(chǎn)品提供5毫克包裝規(guī)格,以提供足夠的產(chǎn)品數(shù)量用于涂覆大面積表面。該產(chǎn)品已經(jīng)消毒,并在適當稀釋后即可使用。
艾美捷PEPTITE-2000,RGD肽#ABM-5020-5MG的應用:
PEPTITE-2000用于涂覆組織培養(yǎng)塑料器皿,以增強細胞附著和粘附。對于不同的細胞類型,細胞附著和培養(yǎng)的合適濃度可能有所不同??赡苄枰M行一些實驗以確定個體細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳條件。典型的工作濃度范圍可能從0.1到10 µg/ml。
PEPTITE-2000,RGD肽特性:
純度:PEPTITE-2000®根據(jù)HPLC分析,純度高于95%。
數(shù)量:每個容器中的肽量為5毫克。
消毒:PEPTITE-2000®已通過電子束輻照消毒。
肽序列:
Ac-Gly-D-Arg-Gly-Asp-Ile-Pro-Ala-Ser-Ser-Lys-Gly-Gly-GlyGly-Ser-D-Arg-Leu-Leu-Leu-Leu-Leu-Leu-D-Arg-NH2
對離子:乙酸鹽
存儲:建議將PEPTITE-2000®在2至10°C或更低的條件下干燥存放。
注意事項:
處理PEPTITE-2000®時,請遵循典型的實驗室安全操作規(guī)范。PEPTITE-2000®作為提供時不適用于人類使用。
PEPTITE-2000,RGD肽使用說明:
使用這些建議作為指導,確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳涂覆條件。為保持無菌,所有操作均應在層流罩內(nèi)進行。提供兩種選擇:
操作步驟A
1. 取下瓶蓋,向瓶中加入5毫升無血清培養(yǎng)基或PBS。
2. 蓋上瓶蓋并振蕩混合。超聲處理樣品至少15分鐘,直至PEPTITE-2000®完-全溶解。
3. 從瓶中轉移所需量的溶液至稀釋容器中。使用無血清培養(yǎng)基或PBS稀釋至所需濃度。典型的工作濃度范圍可能從0.1到10 µg/ml。
4. 向培養(yǎng)表面添加適量稀釋后的物質(zhì)。
5. 在室溫或37°C下覆蓋培養(yǎng)1-2小時。
6. 孵育后,吸去剩余物質(zhì)。
7. 小心用dH2O沖洗培養(yǎng)皿,避免刮傷底部表面。
8. 培養(yǎng)皿已經(jīng)可以使用。如果保持無菌,也可以在2-8°C潮濕或空氣干燥的狀態(tài)下存放。
9. 將剩余溶解的PEPTITE-2000®存儲在2到10°C。
附加說明:在細胞附著溶液中加入二價陽離子(鈣、鎂或錳),以獲得最佳細胞結合。
操作步驟B
1. 取下瓶蓋,向瓶中加入5毫升無菌70%乙醇。
2. 蓋上瓶蓋并振蕩混合。超聲處理樣品至少15分鐘,直至PEPTITE-2000®完-全溶解。
3. 從瓶中轉移所需量的溶液至稀釋容器中。使用70%乙醇稀釋至所需濃度。應測試0.1至10 µg/ml的濃度。
4. 向培養(yǎng)表面添加適量稀釋后的物質(zhì)。
5. 將涂覆的容器放在層流罩中,直到干燥。
6. 小心用dH2O沖洗培養(yǎng)皿,避免刮傷底部表面。
7. 培養(yǎng)皿已經(jīng)可以使用。
8. 將剩余溶解的PEPTITE-2000®存儲在2-10°C。
操作步驟C
1. 取下瓶蓋,稱取所需量的PEPTITE 2000®。
2. 向稱取的PEPTITE 2000®中加入10%二甲基亞砜(DMSO)溶液。振蕩混合至少15分鐘,或直至PEPTITE-2000®完-全溶解。
3. 用水或緩沖液將PEPTITE 2000®溶液稀釋10-20倍。
艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。
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