Advanced BioMatrix 膠原酶，凍干粉使用指南&應(yīng)用領(lǐng)域

膠原酶是一種能夠分解動(dòng)物組織中的原生膠原蛋白的酶類。膠原酶包含一系列酶活性，包括膠原酶、酪蛋白酶、肉毒桿菌蛋白酶和胰蛋白酶，旨在有效水解膠原蛋白并分離組織。這些酶由多種微生物和許多不同的動(dòng)物細(xì)胞制造。強(qiáng)效的膠原酶是厭氧細(xì)菌產(chǎn)生的肉毒桿菌組織溶解素。細(xì)菌膠原酶是一種含有膠原酶的粗制復(fù)合物，更準(zhǔn)確地稱為肉毒桿菌肽酶A，這是一種對脯氨酸-甘氨酸鍵（Pro-X-Gly-Pro序列中的X）具有特異性的蛋白酶，其中X最常是中性氨基酸。這些序列在膠原蛋白中經(jīng)常出現(xiàn)，但在其他蛋白質(zhì)中很少見。盡管許多蛋白酶可以水解單鏈變性的膠原多肽，但肉毒桿菌肽酶A在蛋白酶中獨(dú)-特之處在于它能夠攻擊和降解結(jié)締組織中常見的三股螺旋原生膠原纖維。真正的膠原酶可以同時(shí)跨越所有三個(gè)鏈條進(jìn)行切割，或者在單股上進(jìn)行攻擊。哺乳動(dòng)物膠原酶在特定位點(diǎn)將膠原在其原生三股螺旋構(gòu)象下分裂，產(chǎn)生代表原膠原分子3/4和1/4長度的片段TC A和TC B。碎片化后，這些片段會展開成隨機(jī)多肽，并更容易受到其他蛋白酶的攻擊。

艾美捷膠原酶，凍干粉，50 毫克#ABM-5030-50MG應(yīng)用領(lǐng)域：

膠原酶作為膠原凝膠的解離試劑提供。各種膠原酶產(chǎn)品已經(jīng)專門評估用于與Advanced BioMatrix的膠原產(chǎn)品一起使用。該產(chǎn)品旨在提高從膠原凝膠中分離的細(xì)胞的存活能力和功能性。

膠原酶以50毫克包裝大小的凍干、無菌粉末形式提供。重新溶解后，產(chǎn)品即可使用。

膠原酶作為供應(yīng)的產(chǎn)品不適用于人體使用

膠原酶，凍干粉特性：

來源：來自Clostridium histolyticum

形式：凍干粉末

酶活性：單位干重 > 125 U/mg，酪蛋白酶 > 200 U/mg，肉毒桿菌蛋白酶 < 4 U/mg，胰蛋白酶 < 0.5 U/mg

膠原酶單位定義：1單位在37°C、pH 7.5條件下，在5小時(shí)內(nèi)從膠原中釋放出一個(gè)微摩爾的L-亮氨酸當(dāng)量

包裝大小：50毫克

滅菌：0.22微米過濾

無菌性：無生長

存儲：建議將膠原酶凍干粉末存儲在2-10°C。重新溶解后，產(chǎn)品在2到10°C穩(wěn)定，可保存長達(dá)5天。

膠原酶，凍干粉使用說明：

請按照以下建議作為指南，確定最佳的凝膠解離程序適用于您的培養(yǎng)系統(tǒng)。

1. 在磷酸鹽緩沖鹽水或其他pH中性介質(zhì)中重新溶解凍干膠原酶粉末（50毫克）?？梢允褂玫湫蜐舛?span style="font-family: Calibri;">1毫克/毫升。

2. 吸除膠原凝膠中的培養(yǎng)基。

3. 用預(yù)熱的PBS或其他pH中性介質(zhì)洗滌膠原凝膠2次，以去除可能抑制膠原降解的培養(yǎng)基。

4. 加入適量的膠原酶溶液（一個(gè)凝膠體積應(yīng)該足夠）。例如：對于含有0.5毫升凝膠的24孔板，加入0.5毫升膠原酶溶液。

5. 轉(zhuǎn)移到37°C孵育箱中，孵育30-60分鐘。為了促進(jìn)膠原凝膠更快地解離，可以使用大口徑移液吸頭上下吸移凝膠和膠原酶溶液。

6. 如有必要，再孵育30-60分鐘，以完成凝膠的消化。如果需要，每15分鐘移液攪拌凝膠/細(xì)胞混合物。注意：更厚的凝膠或含有更高細(xì)胞濃度的凝膠可能需要更多時(shí)間。

7. 一旦凝膠完-全消化，向凝膠/細(xì)胞混合物中加入等量的完整培養(yǎng)基，然后收集細(xì)胞。沖洗培養(yǎng)容器，收集任何殘留細(xì)胞。

8. 將細(xì)胞懸浮液在室溫下以250 x g離心5分鐘。

9. 小心吸除上清液，并將細(xì)胞沉淀懸浮在0.5-1毫升新鮮培養(yǎng)基中。

10. 使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和嘗試藍(lán)染色液確定細(xì)胞計(jì)數(shù)和存活率。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。