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纖維連接蛋白是一種廣泛存在的天然細(xì)胞粘附因子,以二聚體形式存在于血漿中,并以多聚體形式存在于細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞表面。纖維連接蛋白是一種糖蛋白,在兩個(gè)二硫鍵連接的220-250 kD亞基上發(fā)現(xiàn)。纖維連接蛋白用于促進(jìn)各種細(xì)胞的附著和粘附。除了其細(xì)胞附著功能外,纖維連接蛋白還可能與膠原蛋白、肝素和其他細(xì)胞表面糖胺聚糖發(fā)生相互作用。Advanced BioMatrix的人源纖維連接蛋白濃度為0.5 mg/ml,每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml的0.45M NaCl、20mM Tris-HCl和12%甘油中。纖維連接蛋白是通過(guò)Ruoslahti等人(1)的方法從人類血漿中純化,使用凝膠親和柱進(jìn)行滅菌處理,通過(guò)0.2µ過(guò)濾器過(guò)濾。
艾美捷人纖維連接蛋白溶液,0.5 mg/ml,1 mg #ABM-5050-1MG應(yīng)用領(lǐng)域:
纖維連接蛋白可用作薄涂層。不同細(xì)胞類型的合適附著和培養(yǎng)濃度可能有所不同??赡苄枰M(jìn)行一些實(shí)驗(yàn)來(lái)確定各個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳條件。纖維連接蛋白不適用于人類。
人纖維連接蛋白溶液特性描述:
來(lái)源:人類血漿
純度:纖維連接蛋白的純度>95%,基于7% SDS-PAGE的考馬斯亮藍(lán)染色。
濃度:纖維連接蛋白的濃度為0.5 mg/ml,每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml緩沖液中。
(1) Ruoslahti, E., E.G. Hayman M. Pierschbacher, and E.Engvall (1982) Fibronectin: Purification, immunochemicalproperties, and biological activities. Meth. Enzymol. 82 Pt A:803-831.
細(xì)胞附著活性:24孔板在PBS中(每孔0.3毫升)中涂覆纖維連接蛋白,于37°C孵育過(guò)夜。經(jīng)BSA阻斷后,TIG-3細(xì)胞(JCRB 0506)(每孔5 X 104細(xì)胞/1 ml DMEM)被加入,并在37°C孵育90分鐘。附著的細(xì)胞通過(guò)庫(kù)侖計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。
pH:纖維連接蛋白溶解在pH約為7的緩沖液中。
儲(chǔ)存:建議將纖維連接蛋白存放在-20°C以下,并避免重復(fù)凍結(jié)和解凍。
人纖維連接蛋白溶液使用說(shuō)明:
請(qǐng)按照以下建議作為指南,確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適的涂層條件。
1. 解凍纖維連接蛋白,并使用無(wú)血清培養(yǎng)基或PBS(不含Ca++,Mg++)稀釋至所需濃度。最終溶液應(yīng)該足夠稀釋,使添加的體積能夠均勻覆蓋表面。
2. 向培養(yǎng)表面添加適量稀釋后的材料。
3. 在室溫孵育約1小時(shí)。
4. 吸去剩余材料。
5. 用雙蒸餾水仔細(xì)沖洗培養(yǎng)皿,避免刮傷底部表面。
6. 培養(yǎng)皿已經(jīng)可以使用。如果保持無(wú)菌性,它們也可以在2-8°C潮濕存放或風(fēng)干。
注意事項(xiàng):用于生產(chǎn)本產(chǎn)品的人源原料已經(jīng)檢測(cè)為乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(HCV)、人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)和2型(HIV-2)以及梅毒均為陰性。請(qǐng)像處理潛在傳染源一樣小心處理。
艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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