Advanced BioMatrix人玻連蛋白溶液的優(yōu)化涂層條件

維龍蛋白是存在于血漿和組織中的一種糖蛋白。在血液中循環(huán)時(shí)，維龍蛋白以75 kD和65 kD多肽的混合物形式存在。維龍蛋白被用于促進(jìn)各種正常和腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞附著、粘附、擴(kuò)散、增殖、遷移和分化。除了其細(xì)胞擴(kuò)散功能外，維龍蛋白還能結(jié)合肝素和膠原蛋白。Advanced BioMatrix的人源維龍蛋白濃度為0.5 mg/ml，每0.1 mg維龍蛋白溶解于0.2 ml的0.15M氯化鈉、0.005M HEPES緩沖液中，pH約為7.4。維龍蛋白通過(guò)Hayman等人的方法（1）從人類(lèi)血漿中純化，使用抗維龍蛋白單克隆抗體親和柱進(jìn)行純化，并通過(guò)0.2µ過(guò)濾滅菌。

艾美捷人玻連蛋白溶液，0.5 mg/ml，0.1 mg #ABM-5051-0.1MG應(yīng)用領(lǐng)域：

Vitronectin被用作薄涂層。細(xì)胞附著和培養(yǎng)的合適濃度可能因不同的細(xì)胞類(lèi)型而異?？赡苄枰恍?shí)驗(yàn)來(lái)確定單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳條件。Vitronectin不適用于人類(lèi)。

人玻連蛋白溶液特性來(lái)源：

人類(lèi)血漿純度：維龍蛋白的純度>95%，基于7.5% SDS-PAGE的考馬斯亮藍(lán)染色。根據(jù)免疫印跡，纖連蛋白污染物含量低于0.04%。

濃度：維龍蛋白濃度為0.5 mg/ml，每0.1 mg維龍蛋白溶解于約pH 7.4的0.2 ml緩沖液中。

細(xì)胞附著活性：24孔板用PBS中的維龍蛋白（每孔0.3 ml）在37°C孵育過(guò)夜。經(jīng)BSA阻斷后，TIG-3細(xì)胞（JCRB 0506）（5 X 104個(gè)細(xì)胞/每1 ml DMEM/孔）加入并在37°C孵育90分鐘。用庫(kù)侖計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)附著的細(xì)胞。

pH：維龍蛋白溶解于pH約為7.4的緩沖液中。

儲(chǔ)存：建議將維龍蛋白儲(chǔ)存在-20°C以下，避免重復(fù)凍結(jié)和解凍。

(1) Hyaman E.G., M.D. Pierschbacher, Y. ohgren, and E.Ruoslahti (1983) Serm spreading facor (Vitronectin) ispresent at the cell surface and in tissues. Proc. Natl.Acad. Scie. U.S.A. 80 (13): 4003-4007

使用說(shuō)明：請(qǐng)按照以下建議作為指導(dǎo)，確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適的涂層條件。

1. 解凍維龍蛋白并使用無(wú)血清培養(yǎng)基或PBS稀釋至所需濃度。最終溶液應(yīng)稀釋到足夠使添加的體積均勻覆蓋表面。

2. 將稀釋后的適量物質(zhì)加入培養(yǎng)表面。

3. 在室溫下孵育1-2小時(shí)。

4. 吸掉剩余物質(zhì)。

5. 用蒸餾水仔細(xì)沖洗培養(yǎng)皿，避免刮傷底部表面。

6. 培養(yǎng)皿已經(jīng)可以使用。如果保持無(wú)菌，它們也可以濕潤(rùn)存放在2-8°C，或者晾干存放。

注意事項(xiàng)：用于生產(chǎn)本產(chǎn)品的人源原料已經(jīng)檢測(cè)為乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒（HCV）、人類(lèi)免疫缺陷病毒1型（HIV-1）和2型（HIV-2）以及梅毒均為陰性。請(qǐng)像處理潛在傳染源一樣小心處理。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。