人纖維連接蛋白溶液在細(xì)胞生長中的作用說明

細(xì)胞纖連蛋白(fibronectin，FN)是一種細(xì)胞外糖蛋白，分別以可溶形式存在于體液中，或以不可溶形式存在于細(xì)胞外基質(zhì)中。作為主要的細(xì)胞粘附分子之一，FN在許多重要的生理過程中起著關(guān)鍵性作用，如胚胎生成，傷口愈合，止血和血栓形成。纖連蛋白表達(dá)的改變，降解以及組合與大量的病理發(fā)生密切相關(guān)，包括癌癥和纖維化。

FN一般以二聚體形式分泌，各個單體的分子量為220～250kDa。主要由成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和肌細(xì)胞等合成，并分布在周圍。會激發(fā)一系列的免疫級聯(lián)反應(yīng)，FN在T細(xì)胞活化過程表現(xiàn)為激活因子。所有FN由同一個基因編碼產(chǎn)生，因轉(zhuǎn)錄后的mRNA經(jīng)組織特異性的不同切割方式生成不同的翻譯產(chǎn)物。FN上的多個結(jié)構(gòu)域能與膠原、纖維蛋白、肝素和特異性細(xì)胞膜受體結(jié)合。其中廣為人知的結(jié)合域是Arg-Gly-Asp序列(RGD)，為整合素識別后調(diào)控細(xì)胞粘附。FN參與體內(nèi)眾多生理作用和功能，如各種細(xì)胞間的吸附和遷移，細(xì)胞骨架組裝，酪氨酸磷酸化和腫瘤轉(zhuǎn)移等。

纖連蛋白(FN)的應(yīng)用：1)作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)；功能在于促進(jìn)細(xì)胞生長，提高細(xì)胞貼壁率，增強(qiáng)細(xì)胞代謝水平，縮短細(xì)胞生長時間；雜交瘤技術(shù)中提高細(xì)胞融合率等。2)疾病診斷和治療；功能在于傷口修復(fù)和愈合，癌癥診斷和治療，治療血管系統(tǒng)和心腦血管疾病等。 

艾美捷人纖維連接蛋白溶液，0.5 mg/ml，1 mg ：

貨號：ABM-5050-1MG

來源：人類血漿

純度：纖維連接蛋白的純度>95%，基于7% SDS-PAGE的考馬斯亮藍(lán)染色。

濃度：纖維連接蛋白的濃度為0.5 mg/ml，每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml緩沖液中。 

細(xì)胞附著活性：24孔板在PBS中（每孔0.3毫升）中涂覆纖維連接蛋白，于37°C孵育過夜。經(jīng)BSA阻斷后，TIG-3細(xì)胞（JCRB 0506）（每孔5 X 104細(xì)胞/1 ml DMEM）被加入，并在37°C孵育90分鐘。附著的細(xì)胞通過庫侖計數(shù)器進(jìn)行計數(shù)。

pH：纖維連接蛋白溶解在pH約為7的緩沖液中。

儲存：建議將纖維連接蛋白存放在-20°C以下，并避免重復(fù)凍結(jié)和解凍。

Advanced BioMatrix的人源纖維連接蛋白濃度為0.5 mg/ml，每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml的0.45M NaCl、20mM Tris-HCl和12%甘油中。纖維連接蛋白是通過Ruoslahti等人（1）的方法從人類血漿中純化，使用凝膠親和柱進(jìn)行滅菌處理，通過0.2µ過濾器過濾。

(1) Ruoslahti, E., E.G. Hayman M. Pierschbacher, and E.Engvall (1982) Fibronectin: Purification, immunochemicalproperties, and biological activities. Meth. Enzymol. 82 Pt A:803-831.

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