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該產(chǎn)品的目的是確定測試樣品中因子P的功能。這個根據(jù)校準品(人血清)設(shè)置定性確定功能100%功能。
該產(chǎn)品僅供經(jīng)過培訓的實驗室人員使用。不得使用結(jié)果用于臨床診斷或患者管理。僅供研究使用。
艾美捷Svar Life Science補體P因子功能檢測試劑盒(#COMPL FPF RUO)內(nèi)容:
一個帶有微孔板(12x8)的框架,涂有抗因子P單克隆抗體,密封在帶有干燥袋的箔包裝中。
1.5毫升陰性對照(NC),綠色,綠色蓋子。準備使用。
3.0毫升校準液,200納克/毫升。準備使用。
32毫升稀釋液(Dil),紅色。準備使用。
30毫升洗滌液,30倍濃縮。
凍干激活劑。
15毫升激活劑稀釋液。準備使用。
3.0毫升抑制劑。準備使用。
含有針對C3b的HRP標記抗體的7.5毫升結(jié)合物,藍色,棕色瓶。準備使用。
15毫升底物TMB,棕色瓶。準備使用。
15毫升終止液(0.5M H2SO4)。準備使用。
需要但未提供的物料或設(shè)備
帶有450納米和620納米濾光片的微孔板讀取器
軌道搖床(200轉(zhuǎn)/分鐘)
帶有一次性吸頭的精密移液器
96孔板或條的密封膜
96孔板或條的洗滌器
吸水紙
試劑和樣本稀釋用的容器
冰塊或相等的板冷卻設(shè)備
計時器
補體P因子功能檢測試劑盒測定原理:
補體因子P功能測定是一種酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),它結(jié)合了功能性補體活性測定的原理和使用針對沉積的補體蛋白的標記抗體。沉積的補體蛋白量與樣本中因子P的功能活性成正比。
一般化驗信息:
穩(wěn)定性和儲存:
所有試劑應(yīng)儲存在2-8°C,激活劑除外。在2-8°C儲存時,稀釋后的洗滌液在試劑盒有效期內(nèi)穩(wěn)定。
凍干激活劑應(yīng)儲存在-20°C或更低溫度。重懸后的激活劑可以在-70°C下冷凍并解凍一次。
樣本收集和準備:
應(yīng)使用無菌靜脈穿刺技術(shù)收集全血樣本,并使用標準程序獲取血清或EDTA血漿。建議每個樣本至少抽取5毫升全血。離心血樣并將無細胞血清或血漿轉(zhuǎn)移到干凈的試管中。
離心后的血清或EDTA血漿可保存在4°C。較長時間儲存時,血清和血漿樣本應(yīng)冷凍在-20°C或更低溫度。建議在分析前不要將測試樣本凍融超過兩次。
每個實驗室應(yīng)確定測試樣本儲存條件的可接受性,因為這可能會因前處理因素而異。
在進行補體P功能測定分析之前,先確定每個測試樣本中因子P的濃度(見第10節(jié)“測定程序"第5步)。對于這種因子P濃度的測定,可以使用Svar Life Sciences AB的因子P定量測定。
補體P因子功能檢測試劑盒文獻參考:
(1) Blatt, A. Z.; Pathan, S.; Ferreira, V. P. Properdin: A Tightly Regulated Critical Inflammatory Modulator.Immunol Rev 2016, 274 (1), 172–190.
(2) Fearon, D. T.; Austen, K. F. Properdin: Binding to C3b and Stabilization of the C3b-Dependent C3 Convertase. J Exp Med 1975, 142 (4), 856–863.
(3) Chen, J. Y.; Cortes, C.; Ferreira, V. P. Properdin: A Multifaceted Molecule Involved in Inflammation and Diseases. Mol. Immunol. 2018, 102, 58–72.
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