詳細(xì)介紹
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒(Af rican swine fever , ASF) 是由非洲豬瘟病毒(Af rican swine fever virus , ASFV) 引起豬的一種急性、熱性、高度接觸傳染性疾病,病死率高達(dá) 100 %,是 我國(guó)一類(lèi)動(dòng)物疫病和世界動(dòng)物衛(wèi)生組織規(guī)定的必須報(bào)告的動(dòng)物疫病,受到世界各國(guó)的高 度重視。因此 ASFV 的快速準(zhǔn)確鑒定,對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。目前,對(duì)于 中國(guó)這種非 ASF 疫區(qū),ASF 的檢測(cè)主要以丌涉及活病毒傳代操作的 PCR 為主,為此本 公司開(kāi)發(fā)了 ASFV 的 PCR 檢測(cè)試劑盒,
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒具有下列特點(diǎn): 1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供病毒 DNA 模板。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性比使用世界動(dòng)物衛(wèi)生組織推薦的引物高 100 倍以上。 3. 特異性高,引物是根據(jù)保守的 vp73 基因設(shè)計(jì),OIE(世界動(dòng)物衛(wèi)生組織)推薦。 4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
規(guī)格及成分
成 份 編號(hào)
50 次 A 型包裝
(CAT#:11-230)
PCR MagicMix 2.0 70802 1 mL
ASFV 專(zhuān)一性引物一 yw313-1 100 uL
ASFV 專(zhuān)一性引物二 yw314-1 100 uL
超純水 100935 1 mL
使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 DNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 DNAout 戒柱
式病毒 DNAout 產(chǎn)品。
二、PCR(60 uL 體系)
1、樣品管:在 PCR 管中加入下列成分:
成分 加入量
PCR MagicMix 2.0 30 uL
待檢測(cè)樣品 DNA(自備) X
ASFV 專(zhuān)一性引物一 2 uL
ASFV 專(zhuān)一性引物二 2 uL
補(bǔ)水到 60 uL
三、PCR 反應(yīng)參數(shù):
過(guò)程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 94℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
(35 個(gè)循環(huán))
94℃ 1 min
50℃ 1 min
72℃ 1 min
zui后延伸 72℃ 10 min
四、電泳檢測(cè)
1、取 10-20 uL PCR 產(chǎn)物直接在 PAGE 戒瓊脂糖凝膠上電泳,zui使用 100 bp DNA
Marker,產(chǎn)物的大小為 278 bp。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 綠如藍(lán)核酸染料SuperBuffer 快速核酸電泳液
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