詳細(xì)介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 乳房鏈球菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Streptococcus uberisPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
東方泰勒蟲PCR檢測試劑盒 Salmonella keuckyPCR
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Salmonella paratyphi BPCR
東西部馬腦脊髓炎病毒(VV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)Salmonella pullorumPCR
冬蟲夏草源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Salmonella saipaulPCR
動物源性成分(S)PCR檢測試劑盒Salmonella spp.PCR
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Cystatin 6(CST6)ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶4ELISA試劑盒 FUT4免費代測試劑
Cystatin 5(CST5)ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶5ELISA試劑盒 FUT5免費代測試劑
Cystatin 4(CST4)ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6ELISA試劑盒 FUT6免費代測試劑
Cystatin 2(CST2)ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7ELISA試劑盒 FUT7免費代測試劑
Cystatin 11(CST11)ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶9ELISA試劑盒 FUT9免費代測試劑
Cystatin 1(CST1)ELISA Kit巖藻糖激酶ELISA試劑盒 FUK免費代測試劑
Zyxin(ZYX)ELISA Kit眼皮膚白化?、虻鞍譋LISA試劑盒 OCA2免費代測試劑
Leukocyte Specific Transcript 1(LST1)ELISA Kit眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子ELISA試劑盒 MITF免費代測試劑
Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily A, Member 3(LILRA3)ELISA Kit眼質(zhì)蛋白ELISA試劑盒 OCLM免費代測試劑
Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2(LAIR2)ELISA Kit氧固醇結(jié)合蛋白樣蛋白8ELISA試劑盒 OSBPL8免費代測試劑
Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 1(LAIR1)ELISA Kit氧還原蛋白過氧化物酶4ELISA試劑盒 PRDX4免費代測試劑
Leukotriene A4(LTA4)ELISA Kit氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長抑制因子1ELISA試劑盒 OSGIN1免費代測試劑
乳房鏈球菌PCR檢測試劑盒乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶1(ACAT1)重組蛋白Recombina Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 1 (ACAT1)
乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶1(ACAT1)重組蛋白Recombina Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 1 (ACAT1)
乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)重組蛋白Recombina Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2 (ACAT2)
乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)重組蛋白Recombina A?