化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 登革病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Dengue Virus(DENV)4RTPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
相關(guān)產(chǎn)品：
波氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
鵝疏螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒
牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
牛皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
牛皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Human zonulin ELISA Kit堿性唾液脯氨suan豐富蛋白2ELISA試劑盒 PRB2免費(fèi)代測(cè)試劑
Human ai-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor aibody,GM-CSF Ab ELISA Kit腱蛋白樣蛋白1ELISA試劑盒 CHRDL1免費(fèi)代測(cè)試劑
Human granulocyte colony-stimulating factor(CSF3)aibody ELISA kit腱調(diào)蛋白ELISA試劑盒 MD免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Leishmania aibody IgG ELISA Kit降鈣素受體ELISA試劑盒 CTR免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Listeria aibody,IgM ELISA Kit降解加速因子ELISA試劑盒 DAF免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Listeria aibody IgG ELISA Kit降脂素ELISA試劑盒 Adipsin免費(fèi)代測(cè)試劑
Human CIRBP ELISA Kit膠乳素ELISA試劑盒 LXN免費(fèi)代測(cè)試劑
human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA kit膠原蛋白ⅡELISA試劑盒 HCBⅡ免費(fèi)代測(cè)試劑
human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA Kit膠原凝集素ELISA試劑盒 Collectin免費(fèi)代測(cè)試劑
Human immunodeficiency virus (HIV) 1+2 aibody ELISA Kit膠質(zhì)細(xì)胞成熟因子γELISA試劑盒 MPFγ免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Tenascin c,C ELISA Kit膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1ELISA試劑盒 GFRα1免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Tenascin, ELISA Kit膠質(zhì)纖維suan性蛋白ELISA試劑盒 GFAP免費(fèi)代測(cè)試劑
登革病毒型PCR檢測(cè)試劑盒乙酰酯酶(A-CHE)測(cè)試盒50管/24樣
乙酰酯酶(AchE)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣
乙酰酯酶(AchE)測(cè)試盒/微量法100T/96S
乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)測(cè)試盒(測(cè)血清)/比色法40管/20樣
乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)測(cè)試盒(測(cè)組織)/比色法40管/20樣
化工儀器網(wǎng)