我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
產(chǎn)品名稱:肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格:5×105
貨號(hào):BJ-01X1807
產(chǎn)品類型:原代細(xì)胞
單位:T25/瓶
提供細(xì)胞鑒定:提供化學(xué)染色報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
小鼠性成纖維生長因子(bFGF/FGF2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒紅1--3-吡咯烷 97%5-氟-2- 97%
小鼠成纖維生長因子4(FGF4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒紅對酰 98%5-氟-2- 98%
小鼠成纖維生長因子6(FGF6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒紅(2S,3aS,7aS)-2-羧八氫吲哚 98%3-氟鄰氨苯 98%
小鼠B激活因子受體(BAFFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒日落黃4,4'-二羧二苯 98%2-氟-3- 98%
小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒日落黃3,4'-二氨二苯 97%2-氟-4- 99%
小鼠B淋巴瘤因子3(Bcl-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒日落黃2-苯氫醌 98%2-氟-6- 98%
小鼠BCL-2同源拮抗劑1(BAK1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒麗絲羅丹明B1,3-二(4-氨苯氧)苯 98%3-氟-2- 99%
小鼠BCL-2相關(guān)X蛋白(Bax)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒麗絲羅丹明B對氨苯叔丁酯 98%4-氟-2- 98%
小鼠BCL-2修飾因子(BMF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚番紅花紅3,5-二氨三氟苯 98%4-氟-3- 98%
小鼠BCL-2相關(guān)死亡促進(jìn)因子因子(BAD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磺酰羅丹明B4-叔丁環(huán)己 98%5-氟-2- 99%
小鼠β素(BTC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磺酰羅丹明B間三氟苯 99%2-氟-3-硝苯 98%
小鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解1(BACE1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒依來鉻藍(lán)R對羥苯 99%2-羥三氟苯 98%
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 依來鉻藍(lán)R對羥苯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)2-氧-5-硝三氟苯 98%
小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒依來鉻藍(lán)R對羥苯 ≥99%4--3-三氟 97%
小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(BID)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒茜素藍(lán)S苯乙 AR,≥98.0% (GC)2-三氟苯 98%
小鼠白介素25(IL-25)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒普魯士藍(lán)苯 AR, ≥99.5%2--3-硝三氟苯 97%
肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞大鼠糖原合成激珊瑚菜內(nèi)酯,珊瑚菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人活化素A珊瑚姜(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1商陸皂苷THuman
大鼠CXC趨化因子配體16商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠可溶性CD30配體商陸皂苷辛Human
大鼠高敏三狀腺原氨芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人心鈉肽芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠干因子/肥大生長因子蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠質(zhì)衍生因子1β蛇床子素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。