詳細介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Radix puerariae |
貨號 | BJ-P988487 |
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
耐斯糖;蔗果四糖三水合物(標準品)英文名稱: Triclopyr產(chǎn)品別名: Neuromedin B ≥90%
南板藍根(標準品)英文名稱: Temephos產(chǎn)品別名: CAL-101
南鶴虱(標準品)英文名稱: Trifluralin solution產(chǎn)品別名: 神經(jīng)激肽B
南沙參(標準品)英文名稱: Triflumuron產(chǎn)品別名: Carfilzomib
南山楂(標準品)英文名稱: Pencycuron產(chǎn)品別名: 人、鼠 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子
南五味子(標準品)英文名稱: Hexythiazox solution產(chǎn)品別名: Mildronate dihydrate
鬧羊花素II英文名稱: Hexythiazox solution產(chǎn)品別名: Empagliflozin (BI 10773)
鬧羊花素III英文名稱: Imazalil solution產(chǎn)品別名: Medetomidine HCl
鬧羊花素V英文名稱: Siduron產(chǎn)品別名: Medetomidine
鬧洋花(標準品)英文名稱: Simazine產(chǎn)品別名: (1R,2R)-N,N'-二羥基-N,N'-雙(二苯基乙?;?環(huán)己烷-1,2-二
擬人參皂苷F11(標準品)英文名稱: Simazine solution產(chǎn)品別名: Motesanib Diphosphate (AMG-706)
擬人參皂苷Rh2(標準品)英文名稱: Phoxim solution產(chǎn)品別名: Foretinib (GSK1363089)
NUDCD3蛋白抗體 O-Desaryl Ranolazine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬-150萬
CD244自然殺傷受體2B4抗體 Desmethyl Ranolazine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000
磷酸化核因子活化T胞漿蛋白2抗體 Ranolazine-d3 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000
壬基酚抗體 Ranolazine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000
神經(jīng)腫瘤Nova2抗原抗體 Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:4000
類固受體激活蛋白3抗體 (R)-Lercanidipine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%
軸突導(dǎo)向因子1抗體 (S)-Lercanidipine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
酪氨酸激酶B抗體 rac N-Demethyl Promethazine 質(zhì)量規(guī)格:>97.5%,BR
跨膜受體蛋白Notch-3抗體 Promethazine Sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:2,000-5,000 units/mg,進分
葛根探針法PCR鑒定試劑盒圖片水鹽單胞菌屬Anti-AKR1B10 Antibody拉丁屬名: Aquisalimona halophila sp.nov.
殼菌Anti-AKR1B1 Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
弗吉尼亞鏈霉菌Anti-AKR1D1 Antibody拉丁屬名: Streptomyces virginiae
粟酒裂殖酵母Anti-AKR1D1 Antibody拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
多主葡萄殼菌Anti-AKT1 Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
灰葡萄孢(灰霉病菌)Anti-AKR7A2 Antibody用途: 教學(xué)科研
HavobacteriumAnti-AKT2 Antibody(原貨號PB0006)拉丁屬名: Havobacterium sp.
綠色木霉Anti-AKT2 Antibody拉丁屬名: Trichoderma viride
秸稈色假單胞菌Anti-Alas1 Antibody拉丁屬名: Pseudomonas straminea
PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。