鈣網蛋白（CRT）ELISA試劑盒說明書

試劑盒內包含了ELISA實驗所需的所有試劑和相關組份。簡單快捷的方案設計和優(yōu)化的試劑配比，為科研工作者提供ELISA實驗分析方案。
試劑盒內含有分析所需的所有必需試劑，操作簡單便捷；試劑盒內組分經實驗優(yōu)化，確保更高的檢測靈敏度
產品名稱：鈣網蛋白(CRT)ELISA試劑盒說明書
英文名稱：CRT ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
分析類型：夾心ELISA
樣本類型：血清、血漿、細胞上清等液體樣本
產品型式：96孔板，可拆
貯存方法：試劑盒未拆開，4℃保存。已拆開，標準品-20℃保存，其它4℃保存。
運輸條件：4℃
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組成：
1 30倍濃縮洗滌液      20ml×1瓶
2 酶標試劑                 6ml×1瓶
3 酶標包被板              12孔×8條
4 樣品稀釋液              6ml×1瓶
5 顯色劑A液               6ml×1瓶   
6 顯色劑B液               6ml×1/瓶  
7 終止液                     6ml×1瓶
8 標準品                     0.5ml×1瓶
9 標準品稀釋液           1.5ml×1瓶
10 封板膜                   2張
樣品收集、處理及保存方法
1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速 小心地分離。
2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
樣本要求 
1．樣本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-577Phospho-HER4 (Tyr984)  磷酸化HER4抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578Phospho-HER4 (Tyr1284)  磷酸化HER4抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-579Phospho-HER4 (Tyr1162)  磷酸化HER4抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-580Phospho-HER4 (Tyr1188)  磷酸化HER4抗體20 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-581c-fos  c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-582TACC2/ AZU1  轉化酸性卷曲含蛋白質2100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-583TPX2  微管相關同源蛋白TPX2抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-584Phospho-c-Fos (Ser32)  磷酸化c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-585Phospho-c-Fos(Thr232)  磷酸化c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586Phospho-c-Fos (Thr325)  磷酸化c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-587CFTR  囊性纖維化跨膜轉運調節(jié)因子抗體20 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-588CG6856/CG6856-PA  果蠅CG6856-PA抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-589VAV3  鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體20 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590CGA/ Chromogranin A  嗜鉻粒素A抗體100µl

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-591phospho-VAV3(Tyr173)  磷酸化鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體100µg

Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-592CKAP5/ch TOG  結腸和肝腫瘤高表達蛋白抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-594CGB  嗜鉻粒素B抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-595CGRP/CGRP2  CGRP降鈣素基因相關肽抗體100 ul
鈣網蛋白(CRT)ELISA試劑盒說明書C ret/RET /FITC  熒光素標記兔抗、大、指狀蛋白RETIgG

Phospho-Ret (Tyr905) /FITC  熒光素標記酸化指狀蛋白RETIgG

Phospho-Ret (Tyr1062)/FITC  熒光素標記酸化指狀蛋白RETIgG

CYP2E1/FITC  熒光素標記抗細胞色素P450ⅡE1IgG

CYP3A4/FITC  熒光素標記抗細胞色素P450 3A4IgG

CYP8A1/PTGIS/FITC  熒光素標記前列環(huán)素合成酶IgG

CYP19/FITC  熒光素標記細胞色素P450 19IgG

CYP21/FITC  熒光素標記21-羥化酶IgG

Cyr61/FITC  熒光素標記富半胱氨酸肝素結合蛋白61IgG
操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。