詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 狄斯瓦螨PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Varroa destructorPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
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黃頭桿狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白MELISA試劑盒 hnRNP MHuman muscarinic acetylcholine receptor, M-AChR Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒 hnRNP Khuman inhibin beta-B, Inhbb Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白IELISA試劑盒 hnRNP I/PTBHuman Orexin receptor, OXR Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白HELISA試劑盒 hnRNP HHuman growth hormone releasing peptide-Ghrelin, GHRP-Ghrelin Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白GELISA試劑盒 hnRNP GHuman calmodulin, CAM Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白EELISA試劑盒 hnRNP EHuman true insulin, TI Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白DELISA試劑盒 hnRNP DHuman Noradrenaline Bitartas, NE-B Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白CELISA試劑盒 hnRNP CHuman prostacycline, PGI Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3ELISA試劑盒 hnRNP A3Human Procalcitonin, PCT Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1ELISA試劑盒 hnRNP A2/B1Human ReverseTri-iodothyronine, rT3 Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1ELISA試劑盒 hnRNP A1Human 6-keto-prostaglandin F1a, 6-K-PGF1a Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0ELISA試劑盒 hnRNP A0Human Peosidine Elisa Kit
異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體ELISA試劑盒 hnRNP/RA33Human metanephrine, MN Elisa Kit
異質(zhì)核糖核蛋白QELISA試劑盒 SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1Human Dopamine D1 receptor, D1R Elisa Kit
狄斯瓦螨PCR檢測(cè)試劑盒碳suan酐酶Ⅵ(CA6)重組蛋白R(shí)ecombina Carbonic Anhydrase VI (CA6)
過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白R(shí)ecombina Peroxiredoxin 5 (PRDX5)
高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白R(shí)ecombina High Temperature Requireme Factor A1 (HTRA1)
非ATP酶體26S亞基13(PSMD13)重組蛋白R(shí)ecombina Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 13 (?