詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:豬腸道杯狀病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Porcine Enteric Calicivirus(PECV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family, Member 7(SLAMF7)ELISA Kit失調(diào)蛋白8ELISA試劑盒 ATXN8免費代測試劑
Signal Transducer And Activator Of Transcription 5B(STAT5B)ELISA Kit失嗅蛋白1ELISA試劑盒 ADMLX免費代測試劑
Signal Transducer And Activator Of Transcription 5A(STAT5A)ELISA Kit濕結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 RTBDN免費代測試劑
Signal Transducer And Activator Of Transcription 2(STAT2)ELISA Kit十四烷基化丙氨suan豐富蛋白激酶C底物ELISA試劑盒 MARCKS免費代測試劑
Signal Transducer And Activator Of Transcription 1(STAT1)ELISA Kit石蛋白1ELISA試劑盒 STON1免費代測試劑
Zinc Finger Homeobox Protein 4(ZFHX4)ELISA Kit石蛋白2ELISA試劑盒 STON2免費代測試劑
Myosin Binding Protein C, Cardiac(MYBPC3)ELISA Kit食道癌相關(guān)基因4ELISA試劑盒 ECRG4免費代測試劑
Lysocardiolipin Acyltransferase 1(LCLAT1)ELISA Kit食欲素ELISA試劑盒 OX免費代測試劑
Cardiolipin Syhase(CLS)ELISA Kit矢車菊苷α1ELISA試劑盒 CEα1免費代測試劑
Ryanodine Receptor 2, Cardiac(RYR2)ELISA Kit矢車菊苷α2ELISA試劑盒 CEα2免費代測試劑
Myocardin(MYOCD)ELISA Kit矢車菊苷β1ELISA試劑盒 CEβ1免費代測試劑
Actin Alpha 1, Cardiac Muscle(ACTC1)ELISA Kit矢車菊苷β2ELISA試劑盒 CEβ2免費代測試劑
豬腸道杯狀病毒PCR檢測試劑盒過氧化還原酶1(PRDX1)重組蛋白Recombina Peroxiredoxin 1 (PRDX1)
苯丙氨suan羥化酶(PAH)重組蛋白Recombina Phenylalanine Hydroxylase (PAH)
醌型二氫蝶啶還原酶(QDPR)重組蛋白Recombina Quinoid Dihydropteridine Reductase (QDPR)
靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)重組蛋白Recombina Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1?