合歡花探針法PCR鑒定試劑盒說明書

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儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
特點優(yōu)勢：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
   5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VPREB3 ELISA Kit包裝1g

層粘連蛋白(LN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VDAC3 ELISA Kit包裝250mg

Endoglin蛋白(ENG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human CNDP2(Cytosolic non-specific dipeptidase) ELISA Kit包裝1g

雄激素受體(AR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VDAC2 ELISA Kit包裝25g

阿黑皮素原(POMC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VCPIP1 ELISA Kit包裝5g

谷胱甘肽還原酶(GR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VEZT ELISA Kit包裝1g

內(nèi)皮素受體A(ETRA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VGLL4 ELISA Kit包裝5g

相關(guān)血漿蛋白A2(PAPPA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human CNDP1(Beta-Ala-His dipeptidase) ELISA Kit包裝1g

補體成分5a(C5a)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VILIP 3 ELISA Kit包裝250mg

乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VMAT2 ELISA Kit包裝5g

乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VMA21 ELISA Kit包裝1g

乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human VASH2(Vasohibin-2) ELISA Kit包裝25g
合歡花探針法PCR鑒定試劑盒說明書德氏乳桿菌德氏亞種Human HCN4(Potassium/sodium hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 4) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. delbrueckii

孟氏假單胞菌Human ATM(Serine-protein kinase ATM) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas   mandelii

釀酒酵母Human SMURF2(E3 ubiquitin-protein ligase SMURF2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

嗜酸乳桿菌Human SERBP1 (Plasminogen activator inhibitor 1 RNA-binding protein) ELISA KIT拉丁屬名: Lactobacillus  acidophilus

香菇Human CAPN15 (Calpain-15) ELISA KIT僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

平臍儒孢菌Human SGIP1 (SH3-containing GRB2-like protein 3-interacting protein 1) ELISA KIT用途: 研究

冬蟲夏草Human SH3BP5L (SH3 domain-binding protein 5-like) ELISA KIT拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis

釀酒酵母Human SETX (Probable helicase senataxin) ELISA KIT拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

哈茨木霉Human SHCBP1 (SHC SH2 domain-binding protein 1) ELISA KIT僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用