天南星PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書

儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
   5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
2'-O-甲基苦參酮英文名稱： Boc-Ala-OSu產(chǎn)品別名: 2-羥基-5-甲基嘧啶

2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷英文名稱： Boc-D-Ala-OH產(chǎn)品別名: 4-乙基-1-萘甲酸

2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷(標(biāo)...英文名稱： Boc-ß-Ala-OH產(chǎn)品別名: N-乙基-N-羥乙基間甲苯

2,3-脫氫維酮英文名稱： Boc-ß-iodo-Ala-OMe產(chǎn)品別名: 2-氨基-3,5-二溴-6-甲基吡啶

2,5,9-三羥基-4-甲氧基-9,10-二氫菲英文名稱： Boc-Arg-OH·HCl·H2O產(chǎn)品別名: 3-酸基-5-氟-4-甲酸

20(21)-脫氫赤芝酸A英文名稱： Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate產(chǎn)品別名: 溴芬酸鈉

20（S）-原人參三（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Boc-Arg(Mts)-OH·CHA產(chǎn)品別名: 4-溴-2-氟-5-甲

21-O-順芷酰基匙羹藤新苷元英文名稱： Boc-Arg(NO2)-OH產(chǎn)品別名: N,N-二乙基間甲苯

23-羥基龍吉苷元英文名稱： Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine 產(chǎn)品別名: 2-甲酰-5-氟吡啶

23-乙酰去氫澤瀉B英文名稱： Boc-Asn-(Xan)-OH產(chǎn)品別名: 2,5-二氯-4,6-二甲基煙

23-乙酰澤瀉B；澤瀉B醋酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Boc-L-Asp(OBzl)-OH產(chǎn)品別名: 2-氯萘

24-乙酰澤瀉F英文名稱： Boc-L-Asp(OcHex)OH產(chǎn)品別名: 2,4-二甲氧基苯甲酸

FBXL20蛋白抗體 Rupatadine fumarate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

FBXL15蛋白抗體 Musk ketone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

FBXL21蛋白抗體 Midostaurin 質(zhì)量規(guī)格：≥96%,美國(guó)進(jìn)口

F-box蛋白家族FBXO7抗體 1,10 –Phenanthroline anhydrous 質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%

F-box蛋白家族FBXO11抗體 1,10-Phenanthroline hydrate 質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%

F-box蛋白家族FBXO25抗體 1,10-Phenanthroline  hydrochloride monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%

F-box蛋白家族FBXO18抗體 Carbetocin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

FRG2B蛋白抗體 Naringenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>90%,標(biāo)準(zhǔn)品

FAM71A蛋白抗體 N(2),9-Diacetylguanine 質(zhì)量規(guī)格：>95%
天南星PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書絨邊乳菇Anti-CD8 alpha/Cd8a Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

絳紅產(chǎn)色小單胞菌Anti-CD81 Antibody拉丁屬名: Micromonospora purpureochromogenes

乳酸乳球菌乳亞種Anti-CD80 Antibody拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp. lactis

枯斑擬盤多毛孢Anti-CD79A Antibody(原貨號(hào)PB0116)僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

石蕊殺菌素鏈霉菌Anti-CD80 Antibody拉丁屬名: Streptomyces litmocidini

日本裂殖酵母Anti-CD81 Antibody拉丁屬名: Schizosaccharomyces japonicus

尖角凸臍蠕孢Anti-CD81 Antibody用途: 研究

真姬菇Anti-CD81 Antibody拉丁屬名: Hypsizigus  marmoreus

總狀共頭霉Anti-CD86 Antibody拉丁屬名: Syncephalastrum  racemosum