詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:胚胎成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格:5×105
貨號:BJ-01X1925
產(chǎn)品類型:原代細(xì)胞
單位:T25/瓶
提供細(xì)胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
大鼠速激肽受體1(TACR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒大豆油化鉛 99.999% metals basis生化分析儀檢定用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 一套
大鼠速激肽受體2(TACR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒大豆油硫鋰 AR, 99.0% 錸-鋨定年標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 187Os:25.46 ng/g,Re:17.39 μg/g
大鼠TH糖蛋白(THP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2) E_x005f_x000C_#7耀.三氟化硝鉛 99.999% metals basis錸-鋨定年標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 187Os:25.46 ng/g,Re:17.39 μg/g
大鼠抗性磷5b(TRACP-5b)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三氟化硝鉛 ≥99.99% metals basis閉口閃點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 70.8℃
大鼠塔塔結(jié)合蛋白(TBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化鍶硝鉛 ACS閉口閃點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 149.2℃
大鼠TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒次亞磷鈉硝鉛 PT閉口閃點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 158.6℃
大鼠TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子4(TAF4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鉻鈉硝鉛 GR閉口閃點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 116.8℃
大鼠微管關(guān)聯(lián)蛋白(MAPτ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒亞硝鈷鈉硝鉛 CP,98.5%開口閃點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 165.8℃
大鼠滑行蛋白α(TXLNa)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒合次硫氫鈉硝鉛 AR,99%開口閃點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 221.2℃
大鼠滑行蛋白β(TXLNb)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,4,6-三溴酚乙鉛(II) ,三水 AR,99.5%Ⅲ 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析
大鼠血管內(nèi)皮酪氨激(TEK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-乙酰吡啶乙鉛 CP,98.0%山梨標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mL,體:純水
大鼠端粒(TE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-乙酰吡啶乙鉛 99.99% metals basis7B 95%
大鼠肌腱蛋白C(TNC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-乙酰吡啶乙鉛(II) ,三水 ACS二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,體:0.05%Na2CO3
大鼠肌腱蛋白X(TNX)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-乙酰吡啶紅色氧化鉛 AR,95%鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000µg/mL,體:1%HCl
大鼠畸胎瘤源性生長因子1(TDGF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-乙酰吡啶紅色氧化鉛 CP,90%鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 100µg/mL,體:1%HCl
大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-乙酰吡啶紅色氧化鉛 98%日落黃標(biāo)準(zhǔn)溶液0.500mg/ml,溶劑:水
胚胎成纖維細(xì)胞分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體苯 BENZYL ALCOHOL(P)Human, Mouse, Rat
精氨結(jié)合蛋白2抗體苯 BENZYL ALCOHOL(P)Human, Mouse, Rat
溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運(yùn)3抗體柚皮素 BENZOYLOXYRESACETOPHENONE, OMEGA-(RG)Human, Mouse, Rat
絲氨蛋白抑制劑13抗體BENZOYLOXYPHLORACETOPHENONE, OMEGA-(RG)Human, Mouse, Rat
絲氨/蘇氨激25抗體苯(安息香) BENZOIC ACID (RG)Human, Mouse, Rat
染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體α-香樹脂 AMYRIN, a-(SH)Human, Mouse, Rat
閱讀障礙相關(guān)蛋白Shootin抗體叔戊/2--2-丁 AMYL ALCOHOL, tert-(SG)Human, Mouse
外紡錘體樣蛋白1抗體叔戊/2--2-丁 AMYL ALCOHOL, tert-(SG)Human, Mouse, Rat
溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體1-戊/正戊 AMYL ALCOHOL, n-(SG)Human, Mouse