川牛膝探針法PCR鑒定試劑盒說明書

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儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
特點優(yōu)勢：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
   5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
白前（標準品）英文名稱： Prussian blue產(chǎn)品別名: 3-溴鄰苯二酚

白屈菜（標準品）英文名稱： Pyronin B產(chǎn)品別名: 2-氨基-5-羥基嘧啶

白屈菜紅堿(標準品）英文名稱： X-Galactosamidide產(chǎn)品別名: 3-溴-4-羥基苯甲酸

白芍（標準品）英文名稱： Fucoxanthin產(chǎn)品別名: 4-溴-3-羥基苯甲酸

白術(shù)（標準品）英文名稱： Brij 58產(chǎn)品別名: 6-溴-7-氮雜吲哚

白術(shù)內(nèi)酯III（標準品）英文名稱： Dithiooxamide產(chǎn)品別名: 油

白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ（標準品）英文名稱： DNase II, from Pocine Pancreas產(chǎn)品別名: 三甘單丁

白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ；蒼術(shù)內(nèi)酯II（標準品）英文名稱： HEC, hydroxyethyl cellulose產(chǎn)品別名: 2-[2-(3-甲氧基苯)乙烯]苯酚

白頭翁（標準品）英文名稱： L-Aspartic acid sodium salt, monohydrate產(chǎn)品別名: 3-環(huán)戊烯-1-

白頭翁皂苷A3(標準品)英文名稱： Lead granules產(chǎn)品別名: 苯氧基乙酸酐

白頭翁皂苷B英文名稱： Mucin from bovine submaxillary glands產(chǎn)品別名: 鉻酸鋰

白頭翁皂苷B4（標準品）英文名稱： N,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC)產(chǎn)品別名: 2-吡啶基硫脲

軟骨基質(zhì)蛋白抗體 Erythromycin lactobionate 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=5%

絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 Dehydro Nisoldipine 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶2抗體 4-Hydroxy Nisoldipine 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99.5%

微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 rac-Ibuprofen Amide 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體 rac 2-Hydroxy Ibuprofen 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)

絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers) 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

MYOZ抗體 1-Oxo Ibuprofen 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

單核趨化蛋白2抗體 Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers) 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,10ng/μl溶于環(huán)己烷
川牛膝探針法PCR鑒定試劑盒說明書酸單胞菌Human FSCN2(Fascin-2) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

鏈格孢Human REG3γ(RegeneRating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

木糖駒形氏桿菌Human CDC42(Cell division control protein 42 homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Komagataeibacter  xylinus

芽孢桿菌屬Human S1PR2(Sphingosine 1-phosphate receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  sp.

細鏈格孢Human S1PR3(Sphingosine 1-phosphate receptor 3) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

野油菜黃單胞菌Human S1PR4(Sphingosine 1-phosphate receptor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Xanthomonas campestris

擬青霉Human LPL(Lipoprotein lipase) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

產(chǎn)色鏈霉菌Human TAC1(Protachykinin-1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces chromogenes

淡紫擬青霉Human PFN2(Profilin-2) ELISA Kit用途: 用作生物防治研究