詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:人細(xì)胞色素P450基因PCR檢測試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
人醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒Human ai-IVIgG aibody Elisa Kit
人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)試劑盒ELISAhuman Ai-Thyroid Microsome Aibody, ATMA/TMAB Elisa Kit
人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA Kithuman Ai-Thyroid Microsome Aibody, ATMA/TMAB Elisa Kit
人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)試劑盒ELISAhuman glutamic acid decarboxylase autoaibody, GAD-Ab Elisa Kit
人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)試劑盒 ELISAHuman platelet aibodies IgG/M/A, PA-IgG/M/A Elisa Kit
人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgM)ELISA檢測試劑盒Human ai-lymphocyte globulin, ALG Elisa Kit
人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgG)ELISA試劑盒Human Ai-trypsin, AT Elisa Kit
人克雷白氏桿菌(klebsiella)試劑盒ELISAHuman ai-ribosomal P protein aibody, ARPA/Rib-P Elisa Kit
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)試劑盒ELISAHuman ai-ribosomal P protein aibody, ARPA/Rib-P Elisa Kit
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) 試劑盒 ELISAHuman Ai-Somatic Muscle Aibody, ASA Elisa Kit
人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒Human Thyroid Aibody, TAb Elisa Kit
人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA檢測試劑盒 Human islet cell aibody, ICA Elisa Kit
人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)檢測試劑盒elisaHuman salivary duct autoaibody, SDA Elisa Kit
人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL) 試劑盒 ELISAHuman mitotic spindle apparatus aibody, MSA Elisa Kit
人細(xì)胞色素P450基因PCR檢測試劑盒Cystathionine (CTH)suan羧化酶(PC)重組蛋白
Cystathionine (CTH)suan羧化酶(PC)重組蛋白
Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)suan脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白
Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)suan脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白
Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)suan脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白
A Disiegrin And Metallopro?