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詳細(xì)介紹
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
產(chǎn)品名稱：DMEM/F12（無(wú)酚紅）基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞
英文名稱：DMEM/F12（無(wú)酚紅）
貨號(hào)：BJ-01X1995
產(chǎn)品規(guī)格：500ml
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1-萘磷鈉鹽1-十二烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品， ≥99.5% (GC)2,4,5-涕 分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬血小板膜糖蛋白II b/III a(GPIIb/IIIa)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-萘磷鈉鹽1-十二烯 95%化鑭,無(wú)水 99.9% (REO),10目
豬多聚免疫球蛋白受體(PIGR/SC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-萘磷鈉鹽1-癸烯 95%氧化鋱 99.99% metals basis
豬α1連接素(CTNNα1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氫鈉1-癸烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)鹽硫 AR,99.0%
豬嗜粒趨化因子受體(ECFR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 氫鈉3,3-二-1- 95%鹽硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鈉乙硫 98%鹽硫 USP
豬白血病抑制因子受體(LIFR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒月桂鈉正十六烷 AR,98%鹽硫 和昆蟲培養(yǎng)級(jí)
豬晶體蛋白(CLC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 油鈉十六烯 94%鹽硫 植物培養(yǎng)級(jí)
豬髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 油鈉十六烯 99%氟化氫銨 99.99% metals basis
豬11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 油鈉十六烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品 ,≥99.8% (GC)鹽硫 AR,99.0%
豬抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吡咯烷二硫代鈉對(duì)苯二酚 AR環(huán)己二氧硅烷 97%
豬FMS樣酪氨激3(Flt3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吡咯烷二硫代鈉對(duì)苯二酚 standard for GC, ≥99.5% (GC)一二乙鋁 1.1M solution in toluene
豬前膠原C端肽(PCP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硬脂鈉對(duì)苯二酚 ≥99.0% (HPLC)一二乙鋁 25 wt. % in toluene
豬α羥丁脫氫(αHBDH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硫代乙鈉異辛烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)二異丁氫化鋁 1.0 M in hexanes
豬蕈型乙酰膽受體亞型M2(M-AChRM2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚烯鈉異辛烷 for HPLC,>99% (GC)二苯二氧硅烷 98%
豬碳酐VB(CA5B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三季銨酚異辛烷 農(nóng)殘級(jí)，>99.5% (GC)倍半乙化鋁 0.4M solution in toluene
DMEM/F12（無(wú)酚紅）基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞胱抑素D/半胱氨蛋白抑制劑D抗體4-羥（標(biāo)準(zhǔn)品） Raltegravir
胱抑素8/半胱氨蛋白抑制劑8抗體4-羥芐;對(duì)羥苯(標(biāo)準(zhǔn)品) Rapamycin(Sirolimus)
胱抑素9/半胱氨蛋白抑制劑9抗體4-羥間苯二（標(biāo)準(zhǔn)品） Rapamycin(Sirolimus)
胱抑素S/半胱氨蛋白抑制劑S抗體4-異丁苯（標(biāo)準(zhǔn)品） Rasagiline Mesylate
煙型乙酰膽受體α3抗體4－[2－（5--2－氧苯酰）－乙]－苯磺... Resveratrol
3號(hào)染色體開放閱讀框33抗體4－差向四環(huán)素（標(biāo)準(zhǔn)品） Resveratrol
3號(hào)染色體開放閱讀框39抗體5'-脫氧-5-氟胞苷(5’-DFCR)(標(biāo)準(zhǔn)品) Retigabine Base
3號(hào)染色體開放閱讀框59抗體5-氨水楊,美拉秦(標(biāo)準(zhǔn)品) Retigabine
5號(hào)染色體開放閱讀框51抗體5-苯-2,4-戊二烯(標(biāo)準(zhǔn)品) Ribavirin
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
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