詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化
產(chǎn)品英文:PC12未分化細(xì)胞
貨號(hào):BJ-01X1724
細(xì)胞培養(yǎng)條件:1640+10%HS(馬血清)+5%FBS+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細(xì)胞STR鑒定:不提供STR鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
蛋白激D2(PKD2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒托普霉素烯酰 AR,99.0%己內(nèi)酰 99%
蛋白激N1(PKN1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒美滿霉素烯酰溶液 蛋白組學(xué)級(jí)鄰二苯 Standard for GC,>99.9%(GC)
蛋白激抑制劑α(PKIα )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒美滿霉素烯酰 Standard for GC,≥99.8% (GC)鄰二苯 for HPLC,99%
蛋白激抑制劑β(PKIβ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒美滿霉素烯酰 分析標(biāo)準(zhǔn)品鄰二苯 98%
蛋白激抑制劑γ(PKIγ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氧氟沙星烯酰 超純級(jí),99.9%鄰二苯 光譜純,99%
蛋白聚糖(PG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氧氟沙星烯酰 for electrophoresis, ≥99%鄰二苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:
蛋白酪氨激(PTK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氧氟沙星叔丁硫 99%鄰二苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.099mg/ml,體:異辛烷
蛋白酪氨磷受體J(PTPRJ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒性霉素B乙硫 98%鄰二苯 CP,97%
蛋白磷(PP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒性霉素B1-辛硫 98%鄰二苯 99%
蛋白磷1調(diào)控亞1A(PPP1R1A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素鈉四氫噻吩 99%中1,2-二苯標(biāo)樣 濃度范圍:1034±18ug/ml,分析標(biāo)準(zhǔn)品
絲氨蛋白1(PRSS1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素鈉皂素 BR,10~25%鄰二苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
絲氨蛋白12(PRSS12)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素鈉皂素 Sapogenin 20-35 % Standard for GC,≥99.5%
蛋白3抗體(PR3Ab)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素鈉 AR,≥99.5% AR
蛋白激活受體2(PAR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素 PT
蛋白C抑制劑(PCI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素 99.99% metals basis ACS
蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氨芐青霉素?zé)o水四鈉 anhydrous, ≥99% 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.6%
PC12未分化細(xì)胞層粘蛋白α3抗體橘葉(標(biāo)準(zhǔn)品) GinsenosideRg5
溶體相關(guān)膜蛋白1抗體巨大戟(標(biāo)準(zhǔn)品) CG
羧肽抑制劑抗體具棲冬青苷(標(biāo)準(zhǔn)品) AMMoniuM MagnesiuM chloride
卵磷酯膽固酰轉(zhuǎn)移抗體瞿麥(標(biāo)準(zhǔn)品) Chebulinic acid
脂蛋白脂抗體卷柏(墊狀卷柏)(標(biāo)準(zhǔn)品) Chebulagic acid
瘦素受體抗體卷柏(卷柏)(標(biāo)準(zhǔn)品) Tigogenin
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體決明蒽醌;美決明子素(標(biāo)準(zhǔn)品) Wedelolactone
磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體決明子(標(biāo)準(zhǔn)品) Sinensetin
磷化腫瘤抑制因LATS1抗體決明子(小決明)(標(biāo)準(zhǔn)品) Chelidonine