詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:小鼠子宮頸癌細胞
產(chǎn)品英文:U14細胞
貨號:BJ-01X1700
細胞培養(yǎng)條件:DMEM +10%FBS+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
凝血因子XII(F12)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T70乙 AR,99.0%β-萘酚 AR
凝血因子V(F5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T70己二 超純級,≥99.5% (HPLC)β-萘酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5%(GC)
凝血因子XI(F11)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T100苯 ACS, ≥99.0%β-萘酚 熒光指示劑, ≥99.0% (GC
凝血因子XIII A1多肽(F13A1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T100 AR,99.5% (劇品) Standard for GC,≥99.8% (GC)
凝血因子XIII B多肽(F13B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T110 光譜級,≥99.5%(GC)鄰苯二 AR,98%
絲切蛋白2(CFL2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T110 色譜級,≥99.8%(GC)3-二乙 99%
抗膠原蛋白抗體(CLA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T200乙酐 AR,98.5%(易制品)N,N-二正辛 95%
XV 型膠原(COL15)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T200冰乙 AR,99.5%癸 98%
II型膠原(COL2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T500雙酚A CP3-二 99%
III型膠原(COL3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T500正丁 CP,98%N-(3-二氨)烯酰 99%
VI型膠原(COL6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T1000正丁 Standard for GC, ≥99.9% (GC)十二 98.0%
I型膠原α2(COL1α2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T1000正丁 AR,99%十二 CP,95%
II型膠原α1(COL2α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒葡聚糖T2000正丁 CP,98%十六 90%
III型膠原α1(COL3α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 葡聚糖T2000正丁 for HPLC,≥99.7% (GC) 十六 98%
IV型膠原α1(COL4α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 聚蔗糖70正丁 >99.5%(GC)油 C18:80-90%
VI型膠原α1(COL6α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 聚蔗糖70正丁 ACS, ≥99.4%十八 90%
U14細胞芐二十六烷化銨芐三化銨
芐三乙化銨草高鐵銨
次亞磷銨化苯三銨
化四庚銨化四戊銨丁二銨