詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品英文:3T3-L1細(xì)胞
貨號:BJ-01X1641
細(xì)胞培養(yǎng)條件:DMEM(含NAHCO3 1.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細(xì)胞STR鑒定:不提供STR鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
雞可溶性間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒支鏈淀粉2-丁炔 98%穿心蓮內(nèi)酯 98%
雞可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 支鏈淀粉2-丁炔乙酯 98%熊果苷 99%
雞可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 支鏈淀粉針頭式過濾器 孔徑:0.22μm 直徑:13.0mm 800個(gè)/箱,100個(gè)/每包扁桃苷 97%
雞表皮生長因子(EGF)試劑盒 支鏈淀粉苯酰 98%扁桃苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%
雞表皮生長因子(EGF)試劑盒 直鏈淀粉1-萘 AR,99.0%氫 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%(HPLC)
雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒 直鏈淀粉1-萘 CP,98%氫 98%
雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒 直鏈淀粉1-萘 分析標(biāo)準(zhǔn)品牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)
雞生長激素(GH)試劑盒 馬鈴薯淀粉1-萘酚 AR,99.0%牛蒡子苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%
雞生長激素(GH)試劑盒 馬鈴薯浸出粉硫代硫鈉,五水 AR,99% 分析標(biāo)準(zhǔn)品
雞乙酰乙檢測(ACAC)試劑盒馬鈴薯浸出粉5-氨-2-三氟苯 98%積雪草 98%
雞乙酰乙檢測(ACAC)試劑盒馬鈴薯浸出粉2-氟芐溴 97% 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%
雞傳染性鼻炎抗體(IC)試劑盒可溶性淀粉3-氟芐溴 95%土木香內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%(HPLC)
雞傳染性鼻炎抗體(IC)試劑盒可溶性淀粉(三氟氧)苯 99%異補(bǔ)骨脂素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%
雞透明質(zhì)(HA)試劑盒糊精4-(三氟氧)苯 97%蘆薈寧 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%
雞透明質(zhì)(HA)試劑盒α-環(huán)糊精烯酰氧三(三硅氧烷)硅烷 97%脫水羊藿素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(HPLC)
雞硫類肝素(HS)試劑盒α-環(huán)糊精過氧化二異苯 CP,98%硫辛 98%
3T3-L1細(xì)胞桉糖
出芽短梗孢糖
多縮木糖
果糖
花楸糖
烏來糖
聚乙酰氨葡糖
殼二糖
漏蘆糖