詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:DRG神經(jīng)元細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格:5×105
貨號(hào):BJ-01X1904
產(chǎn)品類型:原代細(xì)胞
單位:T25/瓶
提供細(xì)胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
大鼠白介素16(IL-16)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒苯苯 for HPLC, ≥99.7%根、硝根和硫根混合溶液體: 0.01MH3BO3,K+2.8mg/L,Na+
大鼠白介素17(IL-17)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二苯 農(nóng)殘,≥99.5% (GC)蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液 200μg/mL,體:
大鼠白介素18(IL-18)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒丁香油苯 99.8%,無水級(jí)血管緊張素II相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 血管緊張素II:1045.5
大鼠白介素21(IL-21)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒對(duì)氧苯苯 GR純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.2%
大鼠白介素23(IL-23)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒水楊酯苯 ACS, ≥99.0%乙純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.8%
大鼠白介素27(IL-27)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒月桂氮卓苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品砷膽標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.374μmol/g
大鼠白介素32(IL-32)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒硬脂酯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 506ug/ml,溶劑:砷甜菜標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.518μmol/g
大鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(IFABP/FABP2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鄰苯二二酯苯 standard for GC, ≥99.9% (GC)阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.2%
大鼠粘蛋白2(MUC2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒硫阿托品苯 AR,99.5% 一溴二標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.930mg/ml,體:
大鼠雙調(diào)蛋白(AR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒化銣苯 CP,99.0%γ-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液 50.0μg/mL,體::苯=4:1
大鼠損傷分子1(KIM-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒溴化苯 PT,99.95%-100.5% (alkalimetric)γ-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液0.100~1.00 μg/mL,溶劑:異辛烷
大鼠乳脫氫(LDH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氧化鐵苯 ACS, 99.5%標(biāo)準(zhǔn)溶液 100µg/mL,體:水
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,6-己二 苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,體: 5%HNO3
大鼠纖維連接蛋白(FN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒O-苯并三氮唑-N,N,N,N-四脲四氟酯苯 ≥99.5%, FCC, Kosher, FG芐嘧磺隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠低密度脂蛋白(LDL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒O-苯并三氮唑-N,N,N,N-四脲四氟酯苯 Standard for quantitative NMR聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 10.8ug/ml,體:
大鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒O-苯并三氮唑-N,N,N,N-四脲四氟酯苯 Ph. Eur., BP, USP, FCC, E210, 99.5-100.5%3,4-苯并芘標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.25μg/mL,體:
DRG神經(jīng)元細(xì)胞泛素連接抗體2-去乙氧-2-羥-1氫-1-乙坎地沙坦酯 Dibenzo[b,def]chrysene
PGBD3蛋白抗體2-十八烯單甘油酯 1,2:8,9-Dibenzopentacene
泛激4抗體2-溴-卡比多巴 Dibenzo[g,p]chrysene
膜鈣ATP1抗體2-氧吡格雷鹽鹽(非對(duì)映異構(gòu)體混合物) Isoviolanthrone
膜鈣ATP4抗體2-乙酰氨-2-脫氧-D-半乳糖 2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
膜鈣ATP4B抗體2-異-6-苯酚(泊酚雜質(zhì)O) Naphtho[2,3-a]pyrene
膜鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP抗體21(R)-羥孟魯司特 2-Chlorophenothiazine
溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體21(S)-羥孟魯司特 2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50)24,32-雙-O-(tert-butyldimeth... Indanthrone