桑枝染料法PCR鑒定試劑盒說明書

儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
特點優(yōu)勢：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
   5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
氧化白藜蘆(標準品)英文名稱： TPCK產(chǎn)品別名: 乙氧甲叉乙酸乙酯

氧化白藜蘆-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： TPCK產(chǎn)品別名: 磷酸三(2-氯乙基)酯

氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： Ala-Gln 產(chǎn)品別名: 2,6-二甲基氯代乙酰苯

氧化槐定堿(標準品)英文名稱： H-Arg-OMe·2HCl產(chǎn)品別名: (R)-(+)-2-(4-羥基苯氧基)酸

氧化槐果堿（標準品）英文名稱： D-Alaninamide hydrochloride產(chǎn)品別名: 4-基苯甲酸甲酯

氧化苦參堿(標準品)英文名稱： Fenticonazole Nitrate產(chǎn)品別名: 3,4-二氟肉桂酸

氧化前胡素(標準品)英文名稱： 1-Benzyl D-Glutamate產(chǎn)品別名: 羥基-B-環(huán)糊精

氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標準品)英文名稱： D-Phenylalanine 產(chǎn)品別名: 2,4,5-三氟-3-甲氧基苯甲酸

藥根堿(標準品)英文名稱： D-Alanine產(chǎn)品別名: 4-溴-2-氟苯甲酸

野百合堿（標準品）英文名稱： β-Alanine產(chǎn)品別名: 苯甲?；宜嵋阴?/span>

野黃芩苷(標準品）英文名稱： β-Alanine產(chǎn)品別名: 十六烷基二甲基叔

野黃芩素(標準品)英文名稱： D-Tryptophan產(chǎn)品別名: 4-甲氧基吡啶 N-氧化物

FYTTD1蛋白抗體 Oxacillin sodium 質(zhì)量規(guī)格：>850μg/mg,BR

RNA結合蛋白9抗體 Oxacillin sodium 質(zhì)量規(guī)格：標準品用于含量測定

巖藻糖轉(zhuǎn)移酶11抗體 (±)-α-Tocopherol nicotinate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

干擾素誘導蛋白15抗體 Fluorescein-5-maleimide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97.0%,進口

P38相互作用蛋白抗體 Veliparib (ABT888) 質(zhì)量規(guī)格：>98%

鈣粘樣蛋白28抗體 Nafcillin sodium salt monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

FA20A抗體 Nafcillin sodium salt monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

成纖維生長因子18抗體 Atosiban Acetate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

叉頭蛋白O1抗體 Trelagliptin free base 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
桑枝染料法PCR鑒定試劑盒說明書哈茨木霉Anti-CCL1 Antibody拉丁屬名: Trichoderma harzianum

松鼠葡萄球菌松鼠亞種Anti-CCL1 Antibody僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

紅色紅曲霉Anti-CCL11 Antibody拉丁屬名: Monascus  ruber

根瘤菌Anti-CCL11 Antibody用途: 固氮

大豆慢生根瘤菌Anti-CCL11 Antibody用途: 益生菌

黑腐皮殼菌Anti-CCL11 Antibody僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

中華根瘤菌Anti-CCL13 Antibody用途: 分類、研究，具有固氮生物肥料潛力。

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Anti-CCL17 Antibody拉丁屬名: Bacillus  amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens

竹喙球菌Anti-CCL19 Antibody僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用