詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 中間葡萄球菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Staphylococcus intermediusPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
大豆PCR檢測試劑盒Ostertagia orloffiPCR
大豆RR PCR檢測試劑盒Ostertagia ostertagiPCR
大豆S/SS PCR檢測試劑盒Ostertagia podjapolskyiPCR
大豆莖潰瘍病菌PCR試劑盒Ostertagia trifurcataPCR
大豆內(nèi)源基因Lectin核suan檢測試劑盒Ovine Ecthyma Virus(Orf)PCR
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Dipeptidase 3(DPEP3)ELISA Kit小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA檢測試劑盒
Dipeptidase 2(DPEP2)ELISA Kit小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒elisa
Dipeptidyl Peptidase 7(DPP7)ELISA Kit小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
Dipeptidyl Peptidase 6(DPP6)ELISA Kit小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒elisa
Dipeptidyl Peptidase 3(DPP3)ELISA Kit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)elisa試劑盒
Dipeptidyl Peptidase 10(DPP10)ELISA Kit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 ELISA
Dihydrofolate Reductase(DHFR)ELISA Kit小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA Kit
Dihydropyrimidinase Like Protein 3(DPYSL3)ELISA Kit小鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒ELISA
Dihydropyrimidinase(DPYS)ELISA Kit小鼠中性粒細(xì)胞彈性(NE) 試劑盒 ELISA
Dihydrolipoyl Succinyltransferase(DLST)ELISA Kit小鼠中性粒細(xì)胞彈性(NE)試劑盒ELISA
Dihydrodiol Dehydrogenase 2(DDH2)ELISA Kit小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL) 試劑盒 ELISA
Dihydrodiol Dehydrogenase(DHDH)ELISA Kit小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒ELISA
中間葡萄球菌PCR檢測試劑盒p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白Recombina p21 Protein Activated Kinase 4 (PAK4)
蛋白激酶D2(PKD2)重組蛋白Recombina Protein Kinase D2 (PKD2)
丙氨suan氨肽酶(AAP)重組蛋白Recombina Alanine Aminopeptidase (AAP)
凋亡關(guān)聯(lián)酪氨suan激酶(AATK)重組蛋白Recombina Apoptosis Associated Tyrosine Kinase (AATK)
水解酶?