詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:McCoy’s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞
英文名稱:McCoy’s 5A
貨號(hào):BJ-01X10001
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬抑瘤素M受體(OSMR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-氧苯乙羥乙纖維素 1500~2500mpa.s,25℃乙酰(降二烯)合銠 97%
豬Rho家族GTP1(RND1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1--2-吡咯烷羥乙纖維素 2600~3300mpa.s,25℃乙酰酰雙(亞乙)化銠 99%
豬結(jié)構(gòu)特異性識(shí)別蛋白1(SSRP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-乙羥乙纖維素 5000~6400mpa.s,25℃二羰乙酰銠 99%
豬蛋白激活受體3(PAR3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-乙四溴化碳 98%三苯膦醋鈀 Pd 14.2%
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-乙四溴化碳 99%1,4-雙(二苯膦丁烷)二化鈀 98%
豬核孔蛋白155kda(NUP155)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡啶鹽鹽銀 99.9%,≤0.1μm雙(乙)化鈀(II) Pd 41.0%
豬胸腺白血病抗原(TLA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吡啶鹽鹽銀 99.95%,1.0μm雙(二苯膦) 98%
豬單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吡啶鹽鹽銀 99.9%,≤0.5μm1,1'-雙(二-叔丁膦)二茂鐵 98%
豬VI型膠原α3(COL6α3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硝苯吡啶三 CP,98.5%(劇品)1,5-雙(二苯膦)戊烷 97%
豬5核苷(5-NT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硝苯吡啶2-氨-2--1- 超純級(jí), ≥99.0% (GC)1,1'-雙(二苯膦)二茂鐵 97%
豬纖蛋白原(FG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硝苯吡啶2-氨-2--1- 97%2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二 96%
豬巨噬炎性蛋白5(MIP-5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶醋丁纖維素 50-54%1,4-雙(二苯膦)丁烷 96%
豬血小板球蛋白β(βTG/PBP/CXCL7/NAP2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶 AR,99.5% (劇品)雙(三苯膦)化鎳(Ⅱ) 98%
豬脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2,2'-聯(lián)吡啶 光譜級(jí),≥99.5%(GC)(R)-(-)-聯(lián)萘酚磷酯 98%
McCoy’s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞豬蛋白激C-θ(PKCθ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,2'-聯(lián)吡啶 色譜級(jí),≥99.8%(GC)[1,3-雙(二苯膦)烷]二化鈀 Pd 18%
豬破骨相關(guān)受體(OSCAR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4,4'-聯(lián)吡啶 農(nóng)殘級(jí) (劇品)二(苯)二化鈀 Pd 27.7%