詳細(xì)介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
產(chǎn)品規(guī)格:100ml/500ml
貨號:BJ-01X1970
保存溫度(℃):2-8℃/-20℃
運輸溫度(℃):2-8℃/-20℃
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
豬二肽肽X (DPP10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1-乙-3-(3-二氨)碳二亞鹽鹽氧化釤 99.99% metals basis對標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:
豬補(bǔ)體因子I(CFI)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚酞單磷環(huán)己鹽氧化釤 40nm 球形,99.5%水質(zhì)亞硝鹽標(biāo)樣 1.20mg/L,分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬叉頭框蛋白P3(FOXP3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚酞單磷環(huán)己鹽氧化銩 99.9% metals basis濃度范圍:0.421-3.32(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬ras同源物因家族成員a(RHOA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒苯酰鋱粉 99.9% metals basis濃度范圍:1.21-3.58(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬核孔蛋白160kda(NUP160)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒苯酰鋱 99.99%水質(zhì)氮氧化物(水劑)標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聯(lián)苯銩片 99.9% (REO)對硝苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:
豬前列腺素內(nèi)過氧化物合1(PTGS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙二鹽鹽氧化鐿 99.9% metals basis硝鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,不確定度2%
豬間隙連接蛋白26(CX26)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 乙二鹽鹽硫化鋅 4N,靶材水質(zhì)總有機(jī)碳標(biāo)樣 濃度范圍:(24.4±1.5)mg/l分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬角蛋白17(CK17/KRT17)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 乙酰硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder中有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)樣分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬跨膜絲氨蛋白2(TMPRSS2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙酰2-氟-5- 98%中有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬Pirin蛋白(PIR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙酰乙酰苯七氟丁 蛋白質(zhì)測序分析,99%五苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液776mg/L,溶劑:
豬抗糖蛋白抗體(GP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-苯酰-N-苯羥離子對PIC,用于LC-MS,0.5mol/L 水溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液1.35-4.29mg/L,水質(zhì)分析用
豬凝血因子Ⅶ(F7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-苯酰-N-苯羥七氟丁 離子色譜級標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:水
豬末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-乙酰苯七氟丁 98%間酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:
豬纖維蛋白肽B(FPB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-乙酰苯全氟丁磺 97%對硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 500μg/ml,溶劑:
豬中性粒激活蛋白3(NAP3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒碳環(huán)己硫鈰,四水 AR,98%中對標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體1,7-雙苯-5-羥-6-庚烯-3- Z-Thr-OH
腺病六鄰體蛋白抗體1,8-桉葉素 Z-β-Ala-OH
高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體1-羥-3,4,5-三氧山(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Glu-OBzl
轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體10-姜酚(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Tyr-OH
熱休克蛋白β7抗體10-羥癸(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Tyr-OMe
E3連接抑制素受體2抗體10-羥癸烯,10-HDA(標(biāo)準(zhǔn)品) Amoxicillin sodium
透明質(zhì)及粘蛋白3抗體10-羥喜樹(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Cbz-D-valine
22號染色體開放閱讀框28抗體10-脫乙酰巴卡亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Arg(Mtr)-OH·CHA
14號染色體開放閱讀框94抗體11(α)氧柴胡皂苷F H-Lys(Z)-OMe hydrochloride