詳細介紹
產(chǎn)品名稱:DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基細胞
英文名稱:DMEM/F12
貨號:BJ-01X1993
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬垂體腺苷環(huán)化激活肽受體 (PACAPR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鈉變色硅膠 LR三羥烷 98%
豬激肽釋放6(KLK6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 鈉亞油 95%6-姜烯酚 分析標準品,≥90%
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鈉亞油 97%8-姜酚 分析標準品,≥95%
豬Fas凋亡抑制分子3(FAIM3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧鈉維D3 98%10-姜酚 分析標準品,≥96%
豬皮膚T淋巴相關(guān)抗原(CLA/CTAGE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧鈉麥角固 95%10-姜酚 95%
豬半乳凝集素7(GAL7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧鈉麥角固 97%6-姜酚 分析標準品,≥98%
豬I型膠原交聯(lián)氨端肽(NTXI)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 L(-)鈉維D2 98%染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)
豬磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 L(-)鈉間苯 99%番瀉苷C 99%
豬原卟啉原氧化(PPOX)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒偏釩鈉均苯四酐 96%鉿粒 99.9% metals basis,1-10mm
豬促血管生成素2(ANG2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒偏釩鈉均苯四酐 99%鈮粉 99.5%,200目
豬腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 無水偏釩鈉叔丁硫 99%三溴硅烷, 含穩(wěn)定劑銅, 98%
豬ADAM金屬肽含血小板反應蛋白1元4(ADAMTS4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 無水偏釩鈉對叔丁鄰苯二酚 98%代環(huán)己烷 99%
豬白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒無水偏釩鈉1- ≥99.0% (GC)1,4-二丁烷 98%
豬蛋白S(PROS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒亞鐵化鈉環(huán)戊烷 Standard for GC,≥99%(GC)六二硅烷 98%
豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒六偏磷鈉環(huán)戊烷 99%(GC)三硅烷 97%
豬表皮角蛋白(EK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 化鈉環(huán)戊烷 96%水中標準溶液100mg/L
DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基細胞固攜帶蛋白2抗體蝦青素 ASTAXANTHIN(P)Human, Mouse, Rat
信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體蝦青素 ASTAXANTHIN(P)Human
碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4抗體APHANIZOPHYLL (SH)Human, Mouse
SHISA蛋白家族9抗體L-(+)-阿拉伯糖 ARABINOSE, L-(+)-(SH)Human, Mouse, Rat
凋亡抑制因子抗體ARNIFOLIN(SH)Human, Mouse, Rat
外紡錘體樣蛋白1抗體ARNIFOLIN(SH)Human, Mouse, Rat
磷化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體ARNIFOLIN(SH)Human, Mouse
抗表面S蛋白抗體氫檳榔 ARECOLINE HYDROBROMIDE(P)Human
突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1丁甜菜乙酯 BUTYROBETAINE ETHYL ESTER CHLORIDE, gamma-(P)Human, Mouse