詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:瘰疬分支桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Mycobacterium scrofulaceumPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
FCN2 ELISA Kit人/1-去氨基-8-右旋-精氨suan加壓素(dDAVP)elisa試劑盒
aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit人去甲腎上腺(NA) ELISA試劑盒
snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit人去甲腎上腺(NA)ELISA檢測試劑盒
Gastric Mucin,GM ELISA Kit人去唾液suan糖蛋白受體(AGSPR)檢測試劑盒elisa
Mucosa-associated Lymphoid Tissue Lymphoma Aibody(MALT Lymphoma Ab)ELISA Kit人去唾液suan糖蛋白受體(AGSPR)試劑盒 ELISA
gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISA Kit人去唾液suan糖蛋白受體(ASGPR)抗體ELISA試劑盒
Gastric irinsic factor,GIF ELISA kit人去唾液suan糖蛋白受體(ASGPR)試劑盒ELISA
gastrin cell aibody,GCA ELISA Kit人去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA檢測試劑盒
pro-gastrin-releasing peptide, ProGRP ELISA Kit人去乙?;窼irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)試劑盒ELISA
gastrin-reliasing peptide,GRP ELISA Kit人去乙酰化酶Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒
CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISA Kit人去乙?;窼irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)檢測試劑盒elisa
pygopus homolog 2,PYGO2/PP7910 ELISA kit人去乙酰化酶Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)試劑盒ELISA
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Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒/微量法100管/48樣
Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒/分光光度法50管/24樣
Ca++Mg++ ——ATP酶比色法檢測試劑盒氧化磷suan化系列50管/24樣可見分光光度法
Ca++Mg++ ——ATP酶比色法檢測試劑盒氧化磷suan化系列100管/48樣微量法