詳細(xì)介紹
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
產(chǎn)品名稱:非必需氨基酸細(xì)胞
英文名稱:MEMNEAA(100x)
貨號:BJ-01X10035
規(guī)格:100ml
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬絲氨蛋白(PRSS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,2-二羥丁胡椒丁 分析標(biāo)準(zhǔn)品三酯 98%
豬早期生長應(yīng)答蛋白3(EGR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2-二羥丁對叔丁鄰苯二酚 98%三酯 ≥99.5%(GC),蒸餾純化
豬蛋白激Cα相互作用蛋白α1(PICK1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,2-二羥丁對叔丁鄰苯二酚 CP三乙酯 97%
豬角蛋白20(CK20/KRT20)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 對稱二苯偶氮羰酰肼5-溴間二苯 98%三異酯 98%
豬游離睪(F-TESTO)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 對稱二苯偶氮羰酰肼2,4-二-6-叔丁苯酚 99%三酯 99.997% metals basis
豬淋巴功能相關(guān)抗原1(LFA-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒石膽4--3,5-二酚 99%乙-D4 (D, 99.5%)
豬正輔因子4(PC4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒石膽3,5-二酚 98%4-溴喹啉-2- 97%
豬泛素結(jié)合E2A(UBE2A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 DL-α-硫辛3,5-二酚 99%苯肼 AR,98.0%
豬蛋白3(PR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒DL-α-硫辛3,5-二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品瓜兒豆膠 粘度:5000-5500厘泊,200目
豬纖維母表面抗原(FSP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 DL-α-硫辛3,5-二 98%鹽氨脲 99%
豬上腺髓質(zhì)素(ADM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 DL-α-硫辛對羥苯 AR,99.0%茜素 97%
豬大腸癌專一抗原3(CCSA-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-溴尿嘧啶氫醌 99%燦爛綠 高純級,95%
豬二氫嘧啶樣蛋白3(DPYSL3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-溴尿嘧啶吩噻 98%鉍試劑II 98%
豬蛋白激C-γ(PKCγ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒5-溴尿嘧啶芐三苯化磷 99%新胭脂紅 85%
豬胰島素樣生長因子不穩(wěn)定亞(IGFALS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 R-(-)-1,2-雙酚AF 98%二苯磺鈉 IND
豬金屬硫蛋白1M (MT1M)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒R-(-)-1,2-四氫氧化銨 AR,25%水溶液丁二肟 AR,98%
非必需氨基酸細(xì)胞琥珀舒馬曲普坦Human, Mouse
華法林Human, Mouse, Rat
華法林鈉Human, Mouse, Rat
環(huán)苯扎林鹽鹽Human, Mouse, Rat
磺吡啶Human, Mouse, Rat
磺氧噠Human, Mouse, Rat
磺嘧啶銀Human, Mouse, Rat
磺噻唑Human
磺達(dá)肝癸鈉Human, Mouse, Rat
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。