詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 馬類圓線蟲PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Strongyloides equinusPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
對蝦白斑病毒PCR檢測試劑盒Sepik VirusRTPCR
對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Serpulina spp.PCR
對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)Serratia liquefaciensPCR
對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Serratia marcescensPCR
對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)核suan檢測試劑盒Severe Fever with Thrombocytopeni?
實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Gamma-Glutamyltransferase 3(gGT3)ELISA Kit乙酰ELISA試劑盒 A-CoA免費代測試劑
Gamma-Glutamyltransferase 2(gGT2)ELISA Kit乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶2ELISA試劑盒 ACAT2免費代測試劑
Gamma-Glutamylcyclotransferase(gGCT)ELISA Kit乙酰復合胺-O-甲基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 ASMT免費代測試劑
Gamma-Lipotropic Hormone(gLPH)ELISA Kit乙酰肝素酶ELISA試劑盒 HPA免費代測試劑
Beta-Lipotropic Hormone(bLPH)ELISA Kit乙酰乙suanELISA試劑盒 ACAC免費代測試劑
Beta-1,4-N-Acetyl Galactosaminyl Transferase 2(b4GAL2)ELISA Kit乙酰乙酰合成酶ELISA試劑盒 AACS免費代測試劑
Beta-1,3-Glucuronyltransferase 1(b3GAT1)ELISA Kit乙型肝炎病毒e抗體ELISA試劑盒 HBeAb免費代測試劑
Alpha-2-Microglobulin Like Protein 1(a2ML1)ELISA Kit乙型肝炎病毒e抗原ELISA試劑盒 HBeAg免費代測試劑
Alpha-1-Aichymotrypsin(a1ACT)ELISA Kit乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白ELISA試劑盒 HBXIP免費代測試劑
Alpha-1-B-Glycoprotein(a1BG)ELISA Kit乙型肝炎病毒X抗原ELISA試劑盒 HBxAg免費代測試劑
Zinedin(ZIN)ELISA Kit乙型肝炎病毒表面抗體ELISA試劑盒 HBsAb免費代測試劑
Enhancer Of Zeste Homolog 2(EZH2)ELISA Kit乙型肝炎病毒核心抗體ELISA試劑盒 HBcAb免費代測試劑
馬類圓線蟲PCR檢測試劑盒硬脂酰去飽和酶(SCD)重組蛋白Recombina Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD)
硬脂酰去飽和酶(SCD)重組蛋白Recombina Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD)
硬脂酰去飽和酶(SCD)重組蛋白Recombina Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD)
含黃素單加氧酶1(FMO1)重組蛋白Recombina Flavin Coaining Monooxygenase 1 (FMO1)?