明黨參探針?lè)≒CR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)

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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
   5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
6-姜酚(姜辣素)英文名稱： Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterile產(chǎn)品別名: 磺酰唑草酮

6-姜烯酚（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate產(chǎn)品別名: 6-溴-4-羥基-3-喹啉羧酸乙酯

6-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sodium succinate產(chǎn)品別名: 酸-2-苯乙酯

6-基異麥冬黃烷酮A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Hemoglobin產(chǎn)品別名: 酸苯甲酯

7,4'-二羥基黃酮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PEG 10000產(chǎn)品別名: 2-脫氧-2,2-二氟-D-赤式-五呋喃糖-3,5-二苯甲酯-1-甲磺酸酯

7,8-二氫生物蝶呤英文名稱： DL-Malic acid產(chǎn)品別名: 磺間甲氧嘧啶

7-O-甲基蘆薈新甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Iron(II) sulfate, heptahydrate產(chǎn)品別名: 2,5-吡二羧酸

7-O-甲基芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Potassium phosphate, tribasic產(chǎn)品別名: 對(duì)乙酮

7-O-乙基莫諾苷英文名稱： Calcein, sodium salt產(chǎn)品別名: 對(duì)羥基苯甲酸正辛酯

7-表紫杉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Phytic acid dodecasodium salt hydrate產(chǎn)品別名: 2'-氯-4',5'-二氟苯乙酮

7-甲氧基-4’-羥基異黃酮(黃豆苷元雜質(zhì))（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Inulin from chicory產(chǎn)品別名: 2-甲氧基-3-三氟甲基吡啶

7-羥基-4-甲基（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Malachite green產(chǎn)品別名: 5-溴-2-苯甲

MSH同源蛋白1樣蛋白抗體 Sulfadiazine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%

膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體 N-Acetyl Sulfadiazine 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=4%

基質(zhì)金屬蛋白酶18/19 Sulfadiazine-d4 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%

富含半胱氨酸蛋白質(zhì)MIG7抗體 Simvastatin, Sodium Salt 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MOS抗體 6'-Hydroxymethyl Simvastatin Acid Sodium Salt 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

單核趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 3’-Hydroxy Simvastatin 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

肌球蛋白重鏈抗體 Simvastatin Acyl-β-D-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)

基質(zhì)金屬蛋白酶28抗體 Simvastatin Dimer Impurity 質(zhì)量規(guī)格：鈉型

基質(zhì)金屬蛋白酶23抗體 Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester 質(zhì)量規(guī)格：for GC,≥99.5%(GC)
明黨參探針?lè)?/font>PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌Human ABP1(Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus firmus

Mucilaginibacter sp.Human MAOA(Amine oxidase [flavin-containing] A) ELISA Kit拉丁屬名: Mucilaginibacter sp.

大腸埃希菌Human GCK(Glucokinase) ELISA Kit拉丁屬名: coli

米曲霉Human CTXI(Cross Linked C-opeptide of Type I Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae

普通變形菌Human ITGA2B(Integrin alpha-IIb) ELISA Kit拉丁屬名: Proteus vulgaris

異配囊接霉Human ANGPT4(Angiopoietin-4) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor heterogamus

香菇Human ITGA2B(Integrin alpha-IIb) ELISA Kit用途: 試驗(yàn)栽培

頭孢霉Human ANGPT4(Angiopoietin-4) ELISA Kit僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

涇陽(yáng)鏈霉菌Human AQP1(Aquaporin-1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces jingyangensis Tao et al.