詳細(xì)介紹
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 登革熱病毒Ⅲ、Ⅳ型PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
利什曼原蟲PCR檢測(cè)試劑盒
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞關(guān)聯(lián)抗原4ELISA試劑盒 CTLA4Mouse Growth Hormone Releasing Peptide, GHRP Elisa Kit
細(xì)胞毒素ELISA試劑盒 CTXMouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand, RANKL Elisa Kit
細(xì)胞凋亡因子配體ELISA試劑盒 Fas-LigandMouse thrombus precursor protein, TpP Elisa Kit
細(xì)胞凋亡抑制因子ELISA試劑盒 IAPMouse gonadotropin-releasing hormone, GnRH Elisa Kit
細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ELISA試劑盒 PYCARDMouse inhibin B, INH-B Elisa Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白ELISA試劑盒 PDCD6IPMouse thyrotropin-releasing hormone, TRH Elisa Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白6ELISA試劑盒 PDCD6Mouse corticotropin releasing hormone, CRH Elisa Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白5ELISA試劑盒 PDCD5Mouse Insulin Receptor β, ISR-β Elisa Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體2ELISA試劑盒 PDCD1LG2Mouse Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白1ELISA試劑盒 PDCD1Mouse lymphocyte function associated aigen 3, LFA-3 Elisa Kit
系統(tǒng)性紅斑狼瘡ELISA試劑盒 SLEMouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1, sPECAM-1 Elisa Kit
錫蛋白ELISA試劑盒 SNNMouse Bone morphogenetic protein 7, BMP-7 Elisa Kit
烯醇化酶磷suan酶1ELISA試劑盒 ENOPH1Mouse Hyaluronic acid, HA Elisa Kit
烯醇化酶4ELISA試劑盒 ENO4Mouse ghcagons-like pepfide 1, GLP-1 Elisa Kit
登革熱病毒Ⅲ、Ⅳ型PCR檢測(cè)試劑盒亮氨酰tRNA合成酶(LARS)重組蛋白R(shí)ecombina Leucyl tRNA Syhetase (LARS)
糖合酶3(CHSY3)重組蛋白R(shí)ecombina Carbohydrate Syhase 3 (CHSY3)
含微管關(guān)聯(lián)單氧化酶調(diào)寧蛋白LIM域蛋白2(MICAL2)重組蛋白R(shí)ecombina Microtubule Associated Monoxygenase, Calponin And LIM Domain Coaining Protein 2 (MICAL2)
肝臟磷suan果糖激酶?
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。