詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:小鼠膀胱癌細胞
產(chǎn)品英文:MB49細胞
貨號:BJ-01X1673
細胞培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
白介素16(IL-16)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒血清白蛋白(組份五)3-吡啶乙鹽鹽 99%桂酯 97%
Apelin 17蛋白(AP17)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 血清白蛋白(組份五)3,4,5-三氧苯乙 97%反式-2,4-癸二烯 >90.0%(GC)
雙調(diào)蛋白(AR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 卵白素(雞蛋)1,2,3,4-四氫-1-萘 98%3,4-二氧苯 ≥98%, FG
抑制素A(INHA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒卵白素(雞蛋)3,4,5-三氧 98%乙癸酯 98%
芳香(ARO)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鏈親和素二硫代磷二乙酯 90%反式-2,4-癸二烯 FG
膽綠素還原B(BLVRB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鏈親和素聚四氟乙烯膜 0.03*300(mm)反式-2-癸烯 95%
抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 牛血紅蛋白三噁烷 >99.5% (GC)反式-2-癸烯 ≥95%, FCC
抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 牛血紅蛋白三惡烷 CP3-羥丁乙酯 97%,FG
抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 牛血紅蛋白利福平 97%濃馥香蘭素 98%
上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白(ACD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 牛血紅蛋白異戊 >99%(GC)薄荷酰 99%,Kosher
乙酰膽(ACH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 豬血紅蛋白異戊 CP,98%4-乙辛 98%
乙酰膽酯(AChE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 豬血紅蛋白1-Boc-3-吡咯烷 97%菠蘿乙酯 99%
乙酰膽受體抗體(AChRab)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 豬血紅蛋白1-Boc-3-羥吖丁啶 97%丁香酚 ≥98%, FCC, Kosher, FG
烏頭2(ACO-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 血纖維蛋白原1,1,2,2-四乙烷 AR,98%羊油 ≥98%,Kosher
白介素18(IL-18)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒血纖維蛋白原1,1,2,2-四乙烷 CP,96%薄荷酰 98%
白介素19(IL-19)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒牛血纖維蛋白原1,1,2,2-四乙烷 Standard for GC乙酰乙酯 99%
MB49細胞半胱氨蛋白8相關(guān)蛋白2抗體甘草(脹果甘草)(標(biāo)準(zhǔn)品) Deuterium Chloride
叉頭蛋白F1抗體甘草查爾 A(標(biāo)準(zhǔn)品) Deuterium Chloride
高嗜性粒綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體甘草查爾B(標(biāo)準(zhǔn)品) Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)
叉頭蛋白D4甘草次(α型),18alpha-甘草次(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzene-D6
磷化細絲蛋白A抗體甘草次(β型),18beta-甘草次(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzene-D6
磷化細絲蛋白A抗體甘草酚 Benzene-D6
FMS樣酪氨激3配體抗體甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzene-D6
F-box富含亮氨重復(fù)蛋白4抗體甘草素(左旋) Benzene-D6
免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體甘草(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzene-D6