詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品英文:pac2細(xì)胞
貨號(hào):BJ-01X1757
細(xì)胞培養(yǎng)條件:L15+10%FBS+1%P/S 28℃培養(yǎng)
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細(xì)胞STR鑒定:不提供STR鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃)28℃
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
黏著斑激(FAK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 尿嘧啶仲丁苯 99%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
鳥氨氨酰轉(zhuǎn)移(OCT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒尿嘧啶苯丁 99%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
鳥氨脫羧(ODC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒尿苷4-溴苯苯 97%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
鳥苷交換因子(GEF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 尿苷4-溴-4',4''-二三苯 95%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
鳥苷結(jié)合蛋白4(GBP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 尿苷2-叔丁蒽醌 98%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒尿苷N,N'-雙(3-氨)乙二 97%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖轉(zhuǎn)移(UGCG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷己二二異辛酯 99%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷苯磺 98%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷二鈉鹽N'N-雙(3-氨) 98%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
尿素相關(guān)蛋白C(UreC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-尿苷一磷二鈉鹽溴鄰苯三酚紅 Indicator豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
內(nèi)皮素受體B(ETRB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷一磷二鈉鹽(S)-(-)-2- 99%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
凝溶膠蛋白(GS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-尿苷一磷二鈉鹽乙叔丁 97%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
凝血(TM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷3,4-苯并芘 96%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
凝血/抗凝血復(fù)合物(TAT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷2- 98%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
凝血敏感蛋白1(TSP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷仲丁 97%豐度:99atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
凝血受體(TR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-尿苷二磷二鈉鹽2-(2-溴乙)-1,3-二惡烷 98%豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5%
pac2細(xì)胞大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽辣椒,辣椒素(天然提取標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人白三烯D4辣蓼(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠抗核抗體萊苞迪甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
兔抑瘤素M萊苞迪甙C(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白萊苞迪甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠解整合素樣金屬蛋白9萊苞迪苷GHuman, Mouse
人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白萊菔子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
植物血凝素蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠解整合素樣金屬蛋白9藍(lán)布正(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat