詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:B淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
貨號(hào):BJ-01X1873
產(chǎn)品類型:原代細(xì)胞
單位:T25/瓶
提供細(xì)胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-苯氨偶氮二羥二芐酯(40% 二 1.7mol/L(±)-α-氧-α-(三氟) 97%
大鼠白介素1α(IL-1α)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-苯氨4-氧苯 99%N-氧-N-(三硅烷)芐 96%
大鼠白介素1β(IL-1β)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-苯氨環(huán)戊 99.9%,含50ppm BHT 抑制劑5-氧-2-吲哚 99+%
大鼠白介素2(IL-2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-苯氨環(huán) 98%6-氧-2-并噻唑 99%
大鼠白介素4(IL-4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-苯氨環(huán) 98%3-氧芐 98%
大鼠白介素6(IL-6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-苯氨5--2-戊 96%2-氧-4-磺酰 98%
大鼠白介素10(IL-10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-苯甘氨5-羥-2-戊 95%2-氧芐 97%
大鼠心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-苯甘氨2-四 99%4-氧化三苯 97%
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-苯甘氨3,5,6-三水楊 99%4-硫-1H-吡啶并[3,4-d]嘧啶 98%
大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-脯氨吡咯烷二硫代銨鹽 95%三氟酯 97%
大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-脯氨溴化乙酰膽 98%5-異噁唑-3-羧 ≥98.0 %
大鼠胰島素(INS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-脯氨吡咯烷二硫代銨鹽 99%1-吲哚-3- 97%
大鼠尿微量白蛋白(MAU)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-蛋氨氟化鋁,三水 CP,97%4-芐硫 97%
大鼠促黃體生成激素(LH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-蛋氨天青A 70%,用于生物染色實(shí)驗(yàn)4-芐 98%
大鼠生長(zhǎng)激素(GH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-蛋氨天青A Biological stain1--1,4-環(huán)己二烯 97%
大鼠素(REN)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-蘇氨氟鈦銨 CP,98%3-環(huán)戊 99%
B淋巴細(xì)胞端羧聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...Human, Mouse
端羧聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...Human
端羧聚乳乙共聚物50/50(重均分子量0.5-...Human
端羧外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬)Human, Mouse
端羧外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)Human, Mouse, Rat
端羧外消旋聚乳(重均分子量109-150萬)Human, Mouse, Rat
端羧外消旋聚乳(重均分子量150-190萬)Human, Mouse, Rat
端羧外消旋聚乳(重均分子量16-28萬)Human, Mouse
端羧外消旋聚乳(重均分子量190-240萬)Human, Mouse