詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Fructus tribuli |
貨號 | BJ-P988129 |
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
磷酸甘油酸變位酶5(PGAM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human ICTP(Cross-linked C-terminal opeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit包裝1g
93kDa核孔蛋白(NUP93)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PCDH11Y ELISA Kit包裝25g
ATM交互子(ATMIN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PCDH11X ELISA Kit包裝5g
Limkainβ1蛋白(LKAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PCDHA3 ELISA Kit包裝25g
Marapsin 2蛋白(MPN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PCDHA2 ELISA Kit包裝100g
視黃脫氫酶15(RDH15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PCDH9 ELISA Kit包裝25g
Penguin蛋白(PEN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PCDHGB3 ELISA Kit包裝500g
Misato同源物1(MSTO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PBRM1 ELISA Kit包裝1g
水解酶2(NIT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PARVG ELISA Kit包裝5g
核仁蛋白58(NOP58)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PARVA ELISA Kit包裝1g
仙人掌素(Cactin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PARVB ELISA Kit包裝1g
胰安肽(Aglycin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PBK ELISA Kit包裝5g
蒺藜染料法PCR鑒定試劑盒價格紅緣擬層孔菌Human GDF10(Bone morphogenetic protein 3B) ELISA Kit僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
明亮發(fā)光桿菌*Human TOX2(TOX high mobility group box family member 2) ELISA Kit拉丁屬名: Photobacterium phosphoreum
遲鈍水桿形菌Human TP53INP1 ELISA Kit拉丁屬名: Undibacterium pigrum
東方伊薩酵母Human TPCN1 ELISA Kit拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
枯草芽孢桿菌Human TPM2 ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌Human TPD52L2 ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
矢野氏鞘氨單胞菌Human TOM1 ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas yanoikuyae
云芝栓孔菌 (變色栓菌)Human TOMM6 ELISA Kit拉丁屬名: Trametes versicolor
陰溝腸桿菌Human TPM3 ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter cloacae
PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。