廣防己染料法PCR鑒定試劑盒說明書

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。

儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
   5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
鹽酸地匹福林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Xanthophyll產(chǎn)品別名: 三氟甲磺酸鈥

鹽酸地匹福林雜質(zhì)A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Xanthophyll產(chǎn)品別名: 伊班膦酸鈉一水合物

鹽酸丁卡因（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ticagrelor產(chǎn)品別名: 4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯

鹽酸丁卡因雜質(zhì)（對(duì)丁氨基苯甲酸）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ticagrelor產(chǎn)品別名: 2-嘧啶甲脒鹽酸鹽

鹽酸丁咯地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ramosetron HCl產(chǎn)品別名: 2-氨基-3-基-5-甲基噻吩

鹽酸丁螺環(huán)酮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sevelamer HCl產(chǎn)品別名: (R)-蘭索拉唑

鹽酸度洛西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sevelamer carbonate產(chǎn)品別名: 磷酸鎘

鹽酸多巴酚丁雜質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nifuroxazide產(chǎn)品別名: 氨基磺酸鈉

鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nifuroxazide產(chǎn)品別名: N-苯甲?；?L-精氨酸

鹽酸多塞平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cepharanthine產(chǎn)品別名: 4-乙基苯磺酰

鹽酸多沙普侖（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cepharanthine產(chǎn)品別名: N-三苯甲基咪唑

鹽酸多佐；鹽酸杜塞酰（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Caspofungin Acetate產(chǎn)品別名: 四氟酸硝酰陽離子

LAMTOR1蛋白抗體 Atorvastatin Lactone 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體 Atorvastatin Acyl-β-D-glucuronide 70%, contains up to 30% lactone 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

ILK結(jié)合蛋白LIMS2抗體 Defluoro Atorvastatin Sodium Salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

淋巴特異性接頭蛋白抗體 Atorvastatin-d5 Lactone 質(zhì)量規(guī)格：>96%，BR

表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子4抗體 Atorvastatin tert-Butyl Ester  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

淋巴抗原6重復(fù)位點(diǎn)蛋白G6F抗體 Atorvastatin Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%，進(jìn)分

樁蛋白抗體 Azelastine-13C,d3 質(zhì)量規(guī)格：>98%(HPLC),BR

脂蛋白受體相關(guān)蛋白/低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1抗體 N-Desmethyl Azelastine 質(zhì)量規(guī)格：工業(yè)級(jí)

皮屑樣蛋白2抗體 (S)-Azelastine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
廣防己染料法PCR鑒定試劑盒說明書白被黑蛋巢Human NLRP2 ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus pallidus

根瘤菌Human NEDD4L ELISA Kit用途: 固氮

嗜酸乳桿菌Human NFIB ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  acidophilus

中慢生華癸根瘤菌Human NEK11 ELISA Kit用途: 與紫云英共生結(jié)瘤固氮

毛木耳(紫木耳、黃背木耳)Human NEK3 ELISA Kit拉丁屬名: Auricularia polytricha (Mont.) Sacc.

支氣管敗血波氏菌Human NEK9 ELISA Kit拉丁屬名: bronchiseptica

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌Human NELF ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis

白僵菌Human CDKN2A(Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, isoforms 1/2/3) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治

釀酒酵母Human CCK(Cholecystokinin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。