詳細(xì)介紹
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Radix rehmanniae |
貨號(hào) | BJ-P988495 |
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
?
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
芹菜素-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷英文名稱: 1,1,3,3-Tetramethyldisilazane產(chǎn)品別名: GNF-2
芹菜素-7-O-葡萄糖酸苷英文名稱: 1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole產(chǎn)品別名: 3-巰基-2-甲基-1-戊
秦皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide 產(chǎn)品別名: 3-溴苯甲酰
秦皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole產(chǎn)品別名: 5-甲基水楊酸甲酯
秦皮甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,3-Bis(chloromethyl)tetramethyldisilazane產(chǎn)品別名: 4-氯-2-羥基苯甲酸甲酯
秦皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetramethyl-1,3-diphenyldisilazane產(chǎn)品別名: Ataluren (PTC124)
秦皮乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Methyl-N-nitrosourethane產(chǎn)品別名: 4-甲基-2-巰基苯并噻唑
青黛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetylimidazole產(chǎn)品別名: 3-氯磺?;?4-氟苯甲酸
青風(fēng)藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-(Heptafluorobutyryl)imidazole 產(chǎn)品別名: 4-氯苯磺酰脲
青果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pentafluorobenzyl Bromide產(chǎn)品別名: β-內(nèi)啡肽,鼠
青蒿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride產(chǎn)品別名: 2,5-二氟苯
青蒿琥酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nonane產(chǎn)品別名: 甲基烯酸十二氟庚酯
酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體 (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
空通氣孔樣蛋白2抗體 Macitentan 質(zhì)量規(guī)格:>99%,內(nèi)皮素(ET)受體拮抗劑
同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體 M344 質(zhì)量規(guī)格:>98%,HDAC抑制劑
磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 2-Nitroimidazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,*
CD39樣蛋白1抗體 4-(Trifluoromethyl)-1H-imidazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%
真核翻譯起始因子5抗體 2-Methyl-4-trifluoromethylimidazole 質(zhì)量規(guī)格:>97%
早期B淋巴因子2抗體 2-Aminoimidazole hemisulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
ELAVL2蛋白抗體 Odanacatib;MK0822 質(zhì)量規(guī)格:>98%,cathepsin K抑制劑
ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體 4-NITROCATECHOL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0% ,標(biāo)準(zhǔn)品
地黃染料法PCR鑒定試劑盒圖片pGLuc-BasicAnti-ANPEP Antibody拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
節(jié)桿菌屬Anti-ANPEP Antibody拉丁屬名: Arthrobacter pascens
白腐盾殼霉Anti-ANXA1 Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
香茅假單胞菌Anti-ANXA10 Antibody拉丁屬名: Pseudomonas citronellolis
少根根霉Anti-ANXA1 Antibody(原貨號(hào)PB0094)拉丁屬名: Rhizopus arrhizus
擬隱孢殼Anti-ANXA1 Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
E.coli BL21(DE3)codon plusAnti-ANXA2 Antibody拉丁屬名: E.coli BL21(DE3)codon plus
豇豆慢生根瘤菌Anti-ANXA3 Antibody用途: 與綠豆花生共生固氮
羅倫隱球酵母羅倫變種Anti-ANXA3 Antibody拉丁屬名: Cryptococcus laurentii
PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。