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落射金相顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。
一、落射金相顯微鏡概述
熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) 是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。
二、落射金相顯微鏡用途
細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
而落射熒光顯微鏡與熒光顯微鏡的主要區(qū)別在于落射光裝置,新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后,波長短的部分(紫外和紫藍(lán))由于濾鏡上鍍膜的性質(zhì)而反射。當(dāng)濾鏡對向光源呈45度傾斜時,波長短的部分則垂直射向物鏡,經(jīng)物鏡射向標(biāo)本,使標(biāo)本受到激發(fā),這時物鏡直接起聚光器的作用;同時,波長長的部分(綠、黃、紅等),對濾鏡是可透的,因此不向物鏡方向反射。濾鏡起了激發(fā)濾板作用,由于標(biāo)本被激發(fā)的熒光處在可見光長波區(qū),可透過濾鏡而到達(dá)目鏡觀察。熒光圖像的亮度隨著放大倍數(shù)增大而提高,在高放大時比透射光源強。它除具有透射式光源的功能外,更適用于不透明及半透明標(biāo)本,如厚片、濾膜、菌落、組織培養(yǎng)標(biāo)本等的直接觀察。近年研制的新型熒光顯微鏡多采用落射光裝置,稱之為落射熒光顯微鏡。