北京單細(xì)胞分選詳細(xì)步驟介紹
閱讀:404 發(fā)布時(shí)間:2021-4-22
生物體有成千上萬種細(xì)胞類型,有多種方法可以從生物體組織中分離出單個(gè)的細(xì)胞。
從實(shí)體組織中單細(xì)胞分選關(guān)鍵兩步:
一,(單個(gè)細(xì)胞)通常是用酶解的方式把離體或者活體分解成單個(gè)的細(xì)胞;
二,單個(gè)的細(xì)胞必須在單個(gè)的反應(yīng)器中進(jìn)行裂解和進(jìn)一步的分析。
利用流式細(xì)胞分選技術(shù)進(jìn)行的單細(xì)胞分選,具有精度高、通量大、分選參數(shù)多,成本相對低等優(yōu)點(diǎn),但要通過流式分選出足夠多的符合要求的單細(xì)胞進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)并沒有那么容易。
下面三方面是要考慮的問題:
1、細(xì)胞活性狀態(tài)對后續(xù)實(shí)驗(yàn)而言很重要,就拿轉(zhuǎn)錄組分析為例,高通量表達(dá)譜芯片技術(shù),都需要高質(zhì)量的RNA樣本,細(xì)胞活性不好或死細(xì)胞會(huì)直接導(dǎo)致 RNA降解,實(shí)驗(yàn)無法繼續(xù)。
2、流式分選是精密度高的儀器,稍稍不同的參數(shù)(激光、液流等)的設(shè)置都會(huì)直接造成結(jié)果偏差;另外既然是想研究單細(xì)胞,那么就得確保分選得到的確為單個(gè)細(xì)胞,否則同樣沒有意義。
3、自動(dòng)化替代人工無疑是提高效率、節(jié)省成本的有力舉措;當(dāng)你需要分選超低含量的細(xì)胞時(shí),務(wù)必是個(gè)長時(shí)間工程,鞘液用光時(shí),其更換繁瑣度、耗時(shí)、連續(xù)性等都是需要考慮的。
因此,Namocell單細(xì)胞分選在這種情況下相比流式分選更具備優(yōu)勢。首先,Namocell單細(xì)胞分選儀體系內(nèi)部的鞘液壓力不到2psi,分選過程極為輕柔,不會(huì)對細(xì)胞造成損傷,因此分選后的細(xì)胞還能保持很好的細(xì)胞活性;其次,Namocell單細(xì)胞分選儀操作使用簡單,無需復(fù)雜的參數(shù)進(jìn)行校準(zhǔn)調(diào)節(jié),開機(jī)2min自動(dòng)初始化后即可開始分選;最后,在總細(xì)胞樣本量低至幾百個(gè)細(xì)胞的少量細(xì)胞樣本,以及陽性含量超低的稀有細(xì)胞樣本,Namocell都有相應(yīng)的分選模式進(jìn)行兼容匹配。