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了解一下單細(xì)胞鋪板可能會出現(xiàn)的問題
閱讀：335 發(fā)布時(shí)間：2021-5-19
單細(xì)胞鋪板采用微流體技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)快速，高效，準(zhǔn)確的細(xì)胞鋪板工作，并且分離過程輕柔，不會影響細(xì)胞的后續(xù)生長，能廣泛應(yīng)用于單抗開發(fā)中的CLD環(huán)節(jié)，以及單細(xì)胞測序等。
原理如下：將細(xì)胞通過一次性的芯片上端加樣孔，注入到芯片腔體中，單細(xì)胞流在微流控通道中流過激光檢測區(qū)域，機(jī)器能對細(xì)胞進(jìn)行識別，去除掉細(xì)胞碎片，死細(xì)胞以及狀態(tài)較差的細(xì)胞，落到孔板中的細(xì)胞都具有很好的活性，高速電子閥門能夠捕獲每一個(gè)活性細(xì)胞，輕柔地落進(jìn)孔板中，整個(gè)過程對細(xì)胞的損傷可以忽略不計(jì)，所以分選得到的細(xì)胞絕大多數(shù)的細(xì)胞都能再次分裂生長。
目前絕大多數(shù)用戶采用的單細(xì)胞鋪板是手動的有限稀釋法，該方法可操作性強(qiáng)，成本低廉。不過，有限稀釋法也存在不足之處，下面我們再來了解一下有限稀釋法進(jìn)行單細(xì)胞鋪板可能會出現(xiàn)的問題
1、細(xì)胞計(jì)數(shù)前后出現(xiàn)較大誤差？
考慮細(xì)胞沉降導(dǎo)致懸液不勻；懸液體積過大或過??；稀釋倍數(shù)太高或太低等原因造成。
2、如何克服細(xì)胞懸液不均勻的問題？
盡量將細(xì)胞吹打?yàn)閱蝹€(gè)，防止抱團(tuán)，且用移液槍充分吹打，使其均勻懸浮在培養(yǎng)基中。
3、一般加多少細(xì)胞懸液合適？
由于加入計(jì)數(shù)室的量，過少會導(dǎo)致計(jì)數(shù)室內(nèi)出現(xiàn)氣泡，過多則會使得計(jì)數(shù)板上的蓋玻片不緊貼計(jì)數(shù)板，使得高度變高。
使用Namocell單細(xì)胞分離儀進(jìn)行單細(xì)胞鋪板，可以避免上述問題，還可以提高效率，用戶可以在1min左右完成一塊96孔板的鋪板工作，并且整板的單細(xì)胞效率可以高達(dá)90%。Namocell單細(xì)胞分離儀是單細(xì)胞鋪板的可靠選擇。